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liuheluo

捐助贵宾 (小有名气)

[求助] 克隆菌不生长-噬菌体感染?

如题,实验室出现克隆菌(大肠)诱导后不生长断断续续已经有2年了,不间断的出现。
不生长有以下几种现象:
1、不生长,但是诱导前后菌浓不变;
2、不生长,诱导后菌浓下降,菌疑似裂解;
3、菌浓略有上升,但较正常生长低很多;
实验室摸索了很多原因,但都无法做统一的解释,包括噬菌体感染,现在也每批次做噬菌斑实验,但发现并非每批次不长都是由噬菌体感染所造成的。

克隆菌不生长的现象大多出现在诱导后,但有极个别也有未诱导菌生长就慢的现象。

这个情况2年了,苦恼死大家了,忘各位虫友帮忙解答。
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bear198338

至尊木虫 (著名写手)

请问楼主,菌生长的溶氧情况如何?我们做的大肠工程菌基本上在IPTG诱导后就停止生长了(OD值和湿重仅能略有增长)。个人经验是不同的质粒可能对菌种的生理情况有影响,不知你们的实验相关文献报道情况怎样。
ps: 我们的菌种中有包含自裂解基因的质粒。
2楼2014-03-20 08:25:23
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liuheluo

捐助贵宾 (小有名气)

很多时候做的摇瓶,不知道溶氧情况。
用的大多为pET系列的载体,我们遇到的不生长是有时是出现的情况,也有时候菌诱导后长势很好,但不好的情况时有出现。
3楼2014-03-20 08:39:36
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bear198338

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuheluo at 2014-03-20 08:39:36
很多时候做的摇瓶,不知道溶氧情况。
用的大多为pET系列的载体,我们遇到的不生长是有时是出现的情况,也有时候菌诱导后长势很好,但不好的情况时有出现。

摇瓶真是不好说了,但是这个季节噬菌体感染的几率太低了。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-03-20 11:36:21
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