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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » hplc转到uplc的洗脱问题
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huihui2255365

金虫 (小有名气)

[求助] hplc转到uplc的洗脱问题 已有3人参与

1是对照品，2是样品
根据HPLC的条件转化成UPLC条件得的，不知道怎样才能有效利用UPLC的快速呢？20分钟太长了，我试着把乙腈比例加大，但是基线不平稳不说，样品19 min那个峰洗不出来，全是杂峰，请高手指点谢谢！！！
HPLC的条件：
0~10 min 乙腈：0.2%磷酸 5:95
10~15 min 乙腈：0.2%磷酸12:88
15~50 min 乙腈：0.2%磷酸 12:88
UPLC条件：
0~5 min 乙腈：0.2%磷酸 5:95
5~10 min 乙腈：0.2%磷酸12:88
10~30 min 乙腈：0.2%磷酸12:88



hplc转到uplc的洗脱问题
1.jpg


hplc转到uplc的洗脱问题-1
2.jpg
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1楼 2014-03-19 11:12:35
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
huihui2255365: 金币+1, ★有帮助 2014-03-19 14:48:24
waters的UPLC可以自己转换出UPLC方法啊 而且您这个图是用e2695做的吧
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2楼2014-03-19 13:00:51
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
huihui2255365: 金币+1, ★有帮助 2014-03-19 14:49:25
huihui2255365: 金币+18, ★★★★★最佳答案 2014-03-20 16:56:39
HPLC转为UPLC后，不用保持出峰时间一致，保留时间长就加大流速，在一个看你的谱图你uplc对你20分钟的峰选择性不好啊，HPLC分的不错啊 为什么要换方法。
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Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
3楼2014-03-19 13:20:18
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很简单哦，增加流动相中乙腈的初始比例
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4楼2014-03-19 13:47:11
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huihui2255365

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2014-03-19 13:00:51
waters的UPLC可以自己转换出UPLC方法啊 而且您这个图是用e2695做的吧

是UPLC啊
就是转换了之后也是这个时间
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5楼2014-03-19 14:48:18
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huihui2255365

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 炜少 at 2014-03-19 13:20:18
HPLC转为UPLC后，不用保持出峰时间一致，保留时间长就加大流速，在一个看你的谱图你uplc对你20分钟的峰选择性不好啊，HPLC分的不错啊 为什么要换方法。

因为我这只有UPLC，HPLC的方法是从别人做的
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6楼2014-03-19 14:49:19
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huihui2255365

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-03-19 13:47:11
很简单哦，增加流动相中乙腈的初始比例

我之前试过10%乙腈，结果后面哪个峰不行
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7楼2014-03-19 14:53:44
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炜少

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by huihui2255365 at 2014-03-19 14:49:19
因为我这只有UPLC，HPLC的方法是从别人做的...

用的是超高效液相色谱柱吗？
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Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
8楼2014-03-20 07:51:56
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huihui2255365

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 炜少 at 2014-03-20 07:51:56
用的是超高效液相色谱柱吗？...

是啊，waters BEH C18 （2.1×100 mm 1.7 μm）
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9楼2014-03-20 08:22:11
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炜少

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by huihui2255365 at 2014-03-20 08:22:11
是啊，waters BEH C18 （2.1×100 mm 1.7 μm）...

你现在用的是0.3的流速吗，好像梯度还得改改。
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Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
10楼2014-03-20 09:11:27
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