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小雨莎莎木虫 (正式写手)
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请教WB方面的一些小细节问题 已有2人参与
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| 请教各位高手，做WB时，滤纸的厚度会对转膜的效率有影响么？因为前两天做WB，用的是Bio-rad的配套的厚滤纸，湿法转膜，10%的胶，蛋白140KD，100V恒压，1h左右，用的是Femantas的大分子量到300KD的预染marker，70KD和100KD的marker是很清晰的，但是后来临时换了whatman的薄滤纸，同样还是左右各三层滤纸，相同的转膜条件，但是marker就不见了，胶上也没有，请问是因为滤纸薄所以容易转过么？还是别的什么原因？今天重复了一次，左右两边放四层滤纸，勉强能看到一点点marker，但是封闭几小时之后几乎就看不到了，很是郁闷，请问如何解决呢？转膜缓冲液是常用的那种２０％甲醇的，含有ＳＤＳ的那种。谢谢啦！ |
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