应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 各位，我800bp的基因测序后有3个点突变，后续能做表达用吗？
51/1返回列表
查看: 2010  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lijia2054224

金虫 (初入文坛)

[求助] 各位，我800bp的基因测序后有3个点突变，后续能做表达用吗？ 已有1人参与

各位，我有个800bp的基因，用takara的Ex-taq酶扩的，直接连到表达载体上，然后送测序，结果发现中间位置有三个点突变，不是同义突变，请问各位我能用这个载体继续往后做吗？我是要做蛋白胡做的。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-05 21:53:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijia2054224

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-03-06 06:37:30
..............
    TaKaRa的Ex-Taq什么时候这么垃圾了，800bp就3个突变.........如果你只测了一个反应，建议你双向测通再看看，有时候测序的事情也说不准，我偶遇过正向一次不对，正向第二个反应+反向重叠时是对的 ...

我也觉得这个酶突变率没这么高，可是突变的位置是一个反应的中间部分，测序峰图看上去也是准确的，而且800bp一个反应基本上就能测通了。。。貌似我得重做了。。。
赞一下 回复此楼
6楼2014-03-06 10:07:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流, 2014-03-06 08:31:11
lijia2054224: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-25 12:33:54
肯定不行，你无法确定这三个突变的是否影响蛋白相互作用。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2014-03-05 23:02:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-03-06 08:31:16
..............
    TaKaRa的Ex-Taq什么时候这么垃圾了，800bp就3个突变.........如果你只测了一个反应，建议你双向测通再看看，有时候测序的事情也说不准，我偶遇过正向一次不对，正向第二个反应+反向重叠时是对的。希望你拿测序图好好对对。据我个人经验，TaKaRa的Ex-Taq不会这么糟糕，我遇到的是2000bp左右有一个突变。
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2014-03-06 06:37:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eclipse88

银虫 (小有名气)
重新够吧 800bp的片段不算大的 为什么不用高保真酶扩增呢？
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-06 08:24:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 6/300 2026-09-03 15:23 by T0rGB46095mJ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 9/450 2026-09-03 15:21 by T0rGB46095mJ
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 rFEsUBKXRll0 2026-09-02 5/250 2026-09-03 15:10 by T0rGB46095mJ
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 8/400 2026-09-03 14:48 by T0rGB46095mJ
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 12:03 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +8 gdd2018 2026-08-28 13/650 2026-09-03 06:22 by 羽毛枫f
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 4/200 2026-09-03 03:14 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭