24小时热门版块排行榜    

查看: 1021  |  回复: 6

wanglavender

新虫 (初入文坛)

[求助] Ligation后跑胶分析 已有5人参与

这是我做的ligation后去一小部分sample跑的胶,顺序分别为Vector Insert and Ligation, 但ligation多条带, 这个能判断ligaiton的情况吗?学长说这个可能是有啦, 但我看不出来, ligation后连成环,这个多带该怎么分析?请大神指导哈,谢谢。
Ligation后跑胶分析
IMG_2783.JPG
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cs2951819

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-22 12:56:39
多条带是正常的,因为有些是成环,有些单链,有些两个质粒连一起,看不一定看的出来,你酶切和pcr检验一下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-02-22 08:43:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒的构象会导致在跑环状的质粒时候出现3条带,正常。鉴定是否插入进去没有你这么鉴定的方法,酶切鉴定才行。
3楼2014-02-22 15:33:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
需要酶切鉴定一下再跑胶看看,质粒一般都是三条带
多情总被无情扰。。。愁
4楼2014-02-22 15:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wanglavender: 金币+3, ★★★很有帮助, Yep, you are right. Beofre doing the transformation, I just want to check if the gel electrophoresis of ligation can indicate some clues about my plasmids. 2014-02-23 00:20:26
连接后直接转化大肠杆菌,挑取单克隆,再酶切鉴定,留下酶切正确的就好了。
5楼2014-02-22 15:53:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
连接反应毕竟只有部分能连上,跑胶不容易看到。建议直接转化,挑阳性克隆就好了。
hehe
6楼2014-02-22 19:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglavender

新虫 (初入文坛)

Thanks guys, your responses are all helpful. Now I kind of know what a successful ligation should be like, before doing transformation.
7楼2014-02-23 00:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wanglavender 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +15 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 15/750 2026-03-02 20:13 by hypershenger
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:59 by hypershenger
[考研] 0854总分272 +3 打小就是老实人 2026-03-02 4/200 2026-03-02 19:49 by 求调剂zz
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +4 gaoxiaoniuma 2026-02-28 5/250 2026-03-02 19:33 by Xinyuu
[考研] 求调剂 +10 yunziaaaaa 2026-03-01 11/550 2026-03-02 19:17 by caszguilin
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 15/750 2026-03-02 18:47 by caszguilin
[考研] 接收调剂 +6 津萌津萌 2026-03-02 13/650 2026-03-02 18:34 by fengyuling00
[考研] 289求调剂 +3 BrightLL 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:28 by 杨杨杨紫
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考博] 诚招农业博士 +3 心欣向荣 2026-02-28 3/150 2026-03-02 13:33 by 时间不狗
[考研] 338求调剂 +3 18162027187 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:12 by houyaoxu
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +4 weizhong123 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:46 by 无际的草原
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +6 ieewxg 2026-02-25 7/350 2026-03-02 12:44 by stidwellNK
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
信息提示
请填处理意见