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花雨渡飞仙

金虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by bobcanada at 2014-02-09 03:50:34
用稀氢氧化钠溶液冲洗管路，不会造成管路的伤害吗？...

蛋白纯化系统的流路一般都是惰性的（AKTA，SCG蛋白纯化系统都是的），用稀氢氧化钠溶液冲洗系统也是蛋白纯化中常用的操作。
如果需要进一步交流可以加QQ524397489
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21楼2014-02-09 09:05:03
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
费姚永芬: 金币+2, 谢谢交流，欢迎常来分析版 2014-02-11 08:15:42
bobcanada: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-02-14 03:03:36
因为你有几年没用，所以你的管路可能较“脏”，你冲洗管路时，可能管路中一些东西污染你的单向阀，导致单向阀不能正常工作，你可以清洗单向阀试一试，不接柱子，用异丙醇做流动相，1.0ml/min，30min，两个泵可以同时冲洗。步进电机也不排除有问题，我有一台仪器和你的状态一样，等度没问题，梯度基线和你的状态一样脉冲厉害，后来换了主板上的一个电容就OK了。另，你的检测器是那一种？电导？示差折光？紫外？
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
22楼2014-02-09 09:08:14
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bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
22楼: Originally posted by kf1009 at 2014-02-09 09:08:14
因为你有几年没用，所以你的管路可能较“脏”，你冲洗管路时，可能管路中一些东西污染你的单向阀，导致单向阀不能正常工作，你可以清洗单向阀试一试，不接柱子，用异丙醇做流动相，1.0ml/min，30min，两个泵可以同时 ...

我的检测器是紫外/可见光检测器(QuadTec UV/VIS Detector)。氘灯：190-370 nm; 卤素灯：370-740 nm.

谢谢指导。我马上冲洗，用双泵走甲醇和异丙醇。
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小木虫-知识宝库的入口。今天，你小木虫了没有？
23楼2014-02-10 21:23:20
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bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 花雨渡飞仙 at 2014-02-09 09:05:03
蛋白纯化系统的流路一般都是惰性的（AKTA，SCG蛋白纯化系统都是的），用稀氢氧化钠溶液冲洗系统也是蛋白纯化中常用的操作。
如果需要进一步交流可以加QQ524397489...

谢谢指导。我用2M的氢氧化钠溶液冲洗，可以吧？
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小木虫-知识宝库的入口。今天，你小木虫了没有？
24楼2014-02-10 21:25:07
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花雨渡飞仙

金虫 (正式写手)
引用回帖:
24楼: Originally posted by bobcanada at 2014-02-10 21:25:07
谢谢指导。我用2M的氢氧化钠溶液冲洗，可以吧？...

我觉得2M有点高，1M应该就好了。这里有一篇文献，你看看http://wenku.baidu.com/link?url= ... 2uUHN2MjFa9Td4w_mTK
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25楼2014-02-11 09:01:50
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bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
25楼: Originally posted by 花雨渡飞仙 at 2014-02-11 09:01:50
我觉得2M有点高，1M应该就好了。这里有一篇文献，你看看http://wenku.baidu.com/link?url=DqbFNr3FPnZXgKhUG4VWwW7kOLbvzcng2z5bJawGnirV_E2vBwxwujNftaHbwNh7pejo3KVLHHzb3HX8BdZW9Y5E2uUHN2MjFa9Td4w_mTK...

谢谢！考虑用0.5－1M的NaOH溶液冲洗。
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26楼2014-02-11 21:24:10
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bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
22楼: Originally posted by kf1009 at 2014-02-09 09:08:14
因为你有几年没用，所以你的管路可能较“脏”，你冲洗管路时，可能管路中一些东西污染你的单向阀，导致单向阀不能正常工作，你可以清洗单向阀试一试，不接柱子，用异丙醇做流动相，1.0ml/min，30min，两个泵可以同时 ...

2个泵同时用甲醇冲洗了半天（1ml/min），又同时用异丙醇冲洗了半天（1ml/min），发现再走梯度（水－乙腈），杂峰仍然很多，没有明显的改善。前天Bio-rad公司的销售代表来了，他们让我先不要用稀NaOH洗系统了，他们回去找技术支持寻找原因，再和我联系。2天了，他们没有消息。

我发现一个现象，等梯度洗脱（A泵为水50%，B泵为甲醇50%），流速不同，杂峰的高度不同。流速0.2ml/min，压力位32PSI；流速1.0ml/min，压力位43PSI；流速4.0ml/min，压力位69PSI。同样的流动相分别走5分钟（只改变流速），流速0.2ml/min的杂峰最高，流速4ml/min的杂峰最低，流速1ml/min的杂峰居中。请看附图，2个图是相同的，为了方便观看，只是比例不同。能看出是泵的问题吗？谢谢！
HPLC问题求助高手
HPLC-water-methanol-3-flow-rates-fullview.PNG


HPLC问题求助高手-1
HPLC-water-methanol-3-flow-rates-postrun.PNG
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27楼2014-02-14 02:56:32
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
bobcanada: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-02-14 23:05:15
你的现象是流速越大，毛刺越小。我个人判断为步进电机或控制步进电机电流的主板有问题，单向阀也不排除。如果实验室有同型号仪器，你可以把坏仪器上的配件逐一换到好的仪器上测试，进口单向阀、出口单向阀、步进电机、主板。 如果是主板问题，工程师一般要求换整块主板，如果你身边有对电子电路比较熟悉的高手，可以让他帮你测试，看看是哪些电子元件故障，买同型号的换上即可，小心注意，这种板是多层电路板。简单一点也可以用吹风吹一下主板上的飞尘，也可以用无水乙醇洗一洗主板，吹干后再试。 祝你好运！
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28楼2014-02-14 09:05:05
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lancelot0411

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
bobcanada: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-02-14 23:05:32
你可以先把仪器彻底冲洗一下再进行试验。这样起码排除一下以前的残留。由于这台仪器以前是做蛋白的，所以冲洗蛋白的方法我不太清楚，给你一个我们冲洗普通管路的方法吧：60℃水冲30min以上换异丙醇30min以上换60℃水30min以上最后用甲醇冲洗整个管路30min以上
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29楼2014-02-14 09:29:44
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可淡不可忘

主管区长 (著名写手)

虫王

优秀区长优秀区长

【答案】应助回帖

★ ★
bobcanada: 金币+2, ★有帮助 2014-02-14 23:05:45
你可以换个有机溶剂试试，比如异丙醇之类
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我亦曾有江湖梦，只是醒来已是过路人
30楼2014-02-14 13:16:59
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