| 查看: 2691 | 回复: 43 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
bobcanada至尊木虫 (文坛精英)
|
[求助]
HPLC问题求助高手 已有3人参与
|
|
|
2000年购买的Bio-Rad 公司的Biologic DuoFlow Chromatography System，一直用于分析蛋白质（凝胶色谱及离子交换色谱）。最近3－4年没有人使用了，一直闲置。现在想用于反相HPLC分析，所以新买了C18色谱柱，但还没有连接上C18色谱柱。准备先试验一下系统是否还工作。遇到了麻烦。 流动相A: 0.1% TFA/水；流动相B: 0.1% 乙腈。使用前，2个流动相溶液都分别用超声波清洗器做15分钟脱气处理。 开始试验系统。流动相：A 90%， B 10%，走3分钟；然后A从 90%到0%， B从 10%到100%，走25分钟。 可以看到，没有连接色谱柱的情况下，色谱图出现很多峰，特别是在走梯度的时候。如果单纯走水，没有这些峰。 水占90%的时候，峰也很少。好像是每间隔2分钟，就出1个峰。是气泡峰吗？还是以前管线里面沉积的蛋白残留物？ 本人没有操作过HPLC，是新手，身边没有人请教。现请教小木虫上都专家和高手，怎么解决？万分感谢！  HPLC-BioLogic DuoFlow.PNG |
回复此楼
可淡不可忘
主管区长 (著名写手)
虫王
- 应助: 19 (小学生)
- 贵宾: 9.522
- 金币: 34596.1
- 散金: 854
- 红花: 40
- 沙发: 6
- 帖子: 2279
- 在线: 1707.9小时
- 虫号: 1839245
- 注册: 2012-05-29
- 专业: 区域环境质量与安全
- 管辖: 网络生活区
30楼2014-02-14 13:16:59
whynotbest
至尊木虫 (职业作家)
淫虫
- 应助: 60 (初中生)
- 贵宾: 0.02
- 金币: 17041.1
- 散金: 605
- 红花: 88
- 帖子: 3278
- 在线: 677小时
- 虫号: 649408
- 注册: 2008-11-08
- 性别: MM
- 专业: 毛泽东思想研究
2楼2014-02-08 02:04:24
bobcanada
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 16733.1
- 散金: 30
- 红花: 14
- 帖子: 12040
- 在线: 329.3小时
- 虫号: 1323303
- 注册: 2011-06-15
- 性别: GG
- 专业: 药物化学
|
乙腈是EMD公司的HPLC专用乙腈。 产品订购来源： https://ca.vwr.com/store/catalog ... g_number=CAAX0145-1 产品检验报告：https://ca.vwr.com/stibo/hi_res/10646475.pdf |
3楼2014-02-08 02:42:16
whynotbest
至尊木虫 (职业作家)
淫虫
- 应助: 60 (初中生)
- 贵宾: 0.02
- 金币: 17041.1
- 散金: 605
- 红花: 88
- 帖子: 3278
- 在线: 677小时
- 虫号: 649408
- 注册: 2008-11-08
- 性别: MM
- 专业: 毛泽东思想研究
4楼2014-02-08 02:48:08
