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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 两种细胞混合培养，是否可用CCK-8测增殖
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章恺悦

禁言 (初入文坛)
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细胞实验操作

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1楼 2014-01-23 14:47:26
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fightcricket

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
T细胞杀伤？Cr-51release才是王道。

[ Last edited by fightcricket on 2014-3-20 at 07:01 ]
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5楼2014-03-20 06:58:53
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suqizhi

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2014-01-23 19:58:09
silicare: 金币+11, BioEPI+1, 应助指数+1, 处女贴 2014-01-27 09:52:02
通常测定细胞的生长状况，可以有两种方法，
1） 对于悬浮细胞，不换液，直接在培养上清中，按照比例加入CCK-8, 培养一段时间即可，此时酚红的干扰几乎可以忽略不计，如果有不含细胞的孔，那么可以直接去除背景，所以问题不大。
2）对于贴壁细胞，建议先把培养基和CCK-8按照比例混合，然后换液培养，这样做的目的是，降低孔间加样的差异。

对于你这两种细胞的情况，
1）如果测定贴壁细胞的生长状况，那么可以把悬浮的T细胞转移掉，使用上述第二种方法测定。
2）如果T细胞对于间充质细胞的生长很关键，不能取走，那么测定的活性程度是总量，此时，需要对每一个孔的T细胞进行估算，如果每个培养条件下T细胞总量接近，或者T细胞含量很少，远远小于间充质细胞，也可以测定，使用对照孔可以去除T细胞的影响。
3）如果T细胞可以短时间内除去，可以找个灵敏度高的CCK-8，信号强，建议细胞量合适的情况下（每一个孔10000个），30分钟左右出读数结果，测定后，可以将T细胞再加入培养孔。 这样做对细胞的生长影响不大。但是如果做动力学，那么要考虑的因素多一些。
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章恺悦
2楼2014-01-23 15:00:54
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章恺悦

禁言 (初入文坛)
送红花一朵
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3楼2014-01-24 10:40:14
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treetreew

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
silicare: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励新虫发帖交流 2014-01-27 09:52:10
多设几组，用手数
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4楼2014-01-24 11:35:57
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