应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于甘油冷冻保藏菌种的问题
141/2返回列表12下一页
查看: 4892  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zjm104273

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于甘油冷冻保藏菌种的问题 已有7人参与

请教各位大侠关于菌株用甘油冷冻保存（-80℃）的几个问题：
1、查网上资料发现甘油终浓度从10%-40%不等，到底哪个浓度最合适，还是说都可以？
2、放线菌和霉菌需制备孢子悬浮液，请问孢子悬浮液是用无菌水还是生理盐水或者缓冲液？放线菌的孢子如何制备？斜面培养后刮取过滤么？如果里面菌丝体存在，对保藏是否有很大影响？
3、混悬好的冻存管是直接放入-80℃冰箱么？不是需要慢冻么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-10 15:01:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

J_iee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zjm104273: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-13 14:55:52
一般20%即可。
等菌体长满整个培养皿时，用生理盐水洗涤静置个几分钟，然后生理盐水与甘油1：1混合。不用慢冻，直接放进-80冰箱。两三年是没有问题的
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2014-01-12 14:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棘白菌素

铜虫 (正式写手)
细菌细胞小 可以采用低浓度的甘油保护液，而霉菌和放线菌，如果有菌丝在里面，建议加大甘油浓度，否则会沉降到底部，保护效果一般，如果是孢子液浓度稍微低些问题也不大，但孢子液最好用生理盐水制备较好。
保种没有死规定，只有效果好与坏；不过菌种比较脆弱或不稳定时，建议操作小心一点，慢冻快溶是基本的原则吧，尤其是低浓度甘油，真心不建议直接放入-80度。
赞一下(1人) 回复此楼
青春留不住，白发自然生！
13楼2014-12-25 11:15:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

小馒头66651

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般实验室用的都是40%的甘油进行保藏，可以保藏一个月到两个月的时间。
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-10 15:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

平原草木

金虫 (初入文坛)
帮顶

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
3楼2014-01-11 06:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般保藏菌种用20-25%的甘油保藏即可，放线菌或霉菌直接用20-25%的甘油洗下孢子制备成孢子悬液分装冻存管，直接放入零下80度低温冰箱保藏，可以保藏2-3年。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-11 09:03:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naipingzai

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们实验室用的50%甘油，细菌和甘油比例是3:7，可以放很多年
赞一下 回复此楼
怀揣一颗向往远方的心，奈何困在实验室的樊笼
5楼2014-01-12 10:56:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们用25%的甘油保存，三四年了菌一样用。
赞一下 回复此楼
hehe
7楼2014-01-12 20:33:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青铜时代

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
各个实验室习惯不同，个人观点10%-40%都可以，甘油浓度越高，从冰箱取出后融化得约快。
一般直接放-80冻就ok了，不用像冻细胞那样慢冻。
赞一下 回复此楼
8楼2014-01-13 01:01:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

orangeleaf

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zjm104273: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-01-13 14:55:38
20%甘油终浓度
孢子悬浮液是用用生理盐水
直接放入-80℃冰箱
赞一下 回复此楼
工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
9楼2014-01-13 09:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivit1986

铁虫 (初入文坛)
个人觉得甘油的浓度看自己，我也查过，众说纷纭，10%-40%都可以，换句话说，你配的甘油浓度就那么准，肯定不可能，所以在一定范围内就可以了，另外紫外线的杀菌主要是对物体表面，而要彻底灭菌，高压蒸汽灭菌效果最好！
赞一下 回复此楼
10楼2014-01-23 11:01:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zjm104273 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +13 冬十三 2026-03-15 14/700 2026-03-21 22:10 by peike
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +3 ￣^￣゜汗 2026-03-19 4/200 2026-03-20 21:01 by zhukairuo
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨； 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭