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zjm104273

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于甘油冷冻保藏菌种的问题 已有7人参与

请教各位大侠关于菌株用甘油冷冻保存(-80℃)的几个问题:
1、查网上资料发现甘油终浓度从10%-40%不等,到底哪个浓度最合适,还是说都可以?
2、放线菌和霉菌需制备孢子悬浮液,请问孢子悬浮液是用无菌水还是生理盐水或者缓冲液?放线菌的孢子如何制备?斜面培养后刮取过滤么?如果里面菌丝体存在,对保藏是否有很大影响?
3、混悬好的冻存管是直接放入-80℃冰箱么?不是需要慢冻么?
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J_iee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zjm104273: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-13 14:55:52
一般20%即可。
等菌体长满整个培养皿时,用生理盐水洗涤静置个几分钟,然后生理盐水与甘油1:1混合。不用慢冻,直接放进-80冰箱。两三年是没有问题的
6楼2014-01-12 14:54:09
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小馒头66651

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般实验室用的都是40%的甘油进行保藏,可以保藏一个月到两个月的时间。
2楼2014-01-10 15:48:12
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平原草木

金虫 (初入文坛)

帮顶

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-01-11 06:59:14
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般保藏菌种用20-25%的甘油保藏即可,放线菌或霉菌直接用20-25%的甘油洗下孢子制备成孢子悬液分装冻存管,直接放入零下80度低温冰箱保藏,可以保藏2-3年。
4楼2014-01-11 09:03:32
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