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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于甘油冷冻保藏菌种的问题
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zjm104273

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于甘油冷冻保藏菌种的问题 已有7人参与

请教各位大侠关于菌株用甘油冷冻保存（-80℃）的几个问题：
1、查网上资料发现甘油终浓度从10%-40%不等，到底哪个浓度最合适，还是说都可以？
2、放线菌和霉菌需制备孢子悬浮液，请问孢子悬浮液是用无菌水还是生理盐水或者缓冲液？放线菌的孢子如何制备？斜面培养后刮取过滤么？如果里面菌丝体存在，对保藏是否有很大影响？
3、混悬好的冻存管是直接放入-80℃冰箱么？不是需要慢冻么？
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1楼 2014-01-10 15:01:13
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)
细菌细胞小 可以采用低浓度的甘油保护液，而霉菌和放线菌，如果有菌丝在里面，建议加大甘油浓度，否则会沉降到底部，保护效果一般，如果是孢子液浓度稍微低些问题也不大，但孢子液最好用生理盐水制备较好。
保种没有死规定，只有效果好与坏；不过菌种比较脆弱或不稳定时，建议操作小心一点，慢冻快溶是基本的原则吧，尤其是低浓度甘油，真心不建议直接放入-80度。
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青春留不住，白发自然生！
13楼2014-12-25 11:15:51
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小馒头66651

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般实验室用的都是40%的甘油进行保藏，可以保藏一个月到两个月的时间。
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2楼2014-01-10 15:48:12
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平原草木

金虫 (初入文坛)
帮顶

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-01-11 06:59:14
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般保藏菌种用20-25%的甘油保藏即可，放线菌或霉菌直接用20-25%的甘油洗下孢子制备成孢子悬液分装冻存管，直接放入零下80度低温冰箱保藏，可以保藏2-3年。
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4楼2014-01-11 09:03:32
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