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fluffylee

铜虫 (小有名气)

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[求助] 关于HPLC使用结束C18柱子的清洗已有1人参与

实验室有台Agilent 1290 UPLC，用的是二元液相泵。A1（1%醋酸：99%水，v/v）和B1（50%甲醇：50%乙腈：v/v）里的流动相是用来测橄榄/橄榄油中多酚物质的，A2和B2也是固定经常测橄榄/橄榄油里别的物质的。
每次测完多酚，都会用B1流动相无梯度洗脱1小时，不知道这样可以吗？看了些资料说柱子最好保存在100%甲醇里因为甲醇抗菌效果比乙腈好？还有就是一般使用完毕柱子清洗是不是用这个梯度的比较多：10%甲醇水溶液1h-50%甲醇水溶液1h-100%甲醇水溶液1h，流速0.2ml/min合适吗？
我的问题是我一般很多样品，每个样品要跑1h，一般我都是白天做好一个list，让它跑着晚上它就自动关了。这种情况下，我是不是每次都需要把A2/B2的溶液换掉换成A2（水）/B2（甲醇）最后清洗一遍我的柱子？还是用B1这个混合溶液0.2mL/min洗1h就ok（而且我一般最后洗两遍，就是2h）？
谢谢大家啦！

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1楼2014-01-08 13:47:38

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fluffylee

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引用回帖:

4楼: Originally posted by yyall at 2014-01-08 16:00:29
你用的B1应该可以的。比例有点高，会不会浪费？但是不能保护柱子用。...

那我以后还是把A2和B2换成水和甲醇好了···这样每次跑完我的sample在list最后加个wash method 跑个梯度最后让柱子保存在100%甲醇里好了，这样就没问题了吧

还有个疑问哈~你每次换流动相的时候，比如要把B2的5%甲醇水溶液换成100%水，你是直接先把filter放在一小杯水里浸泡一会儿，然后把filter放进要用的B2水中，还是什么别的方法？我知道如果前后溶剂不相溶的话需要用100%异丙醇过渡，但是如果相溶直接放进下一种溶剂不是污染了么。。不知道你们用什么方法？
谢谢！