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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 噬菌体感染 处理方法 求助~
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)

[求助] 噬菌体感染 处理方法 求助~ 已有3人参与

早上用试管摇的种子 7~8ml  下午四点多接到含有500ml培养基的锥形瓶中 锥形瓶容积是3L 接种1.5h后目测OD600能达到0.4~0.5 过半个小时再去看 培养基已经变澄清了 里面好多菌体碎片 一共摇了4个瓶子都是这种情况  有人说是噬菌体感染 想问一下有没有出现类似情况的虫友 是怎么处理的呢 除了甲醛高锰酸钾熏蒸  又没有操作性好一些的方法呢
我的菌种是刚挑的单克隆保存的 不超过一个星期 是PET28 in Rosetta DE3 想要扩增菌体之后提蛋白 求大神给予指点啊~
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金戈铁马你要等我
1楼 2013-12-30 12:09:00
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)
感谢帮助~锥形瓶用锡箔纸封口应该没有事吧 刚买了一些消毒液 准备把接种的试管锥形瓶消毒一下 不知道有没有用 哎~
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金戈铁马你要等我
3楼2014-01-01 09:35:35
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)
种子是上午九点多从甘油保存的菌里面挑的 下午四点接种到大的锥形瓶中 摇了七个小时 能不能问一下现在我该怎么处理啊 刚买了一大箱84 准备实验室彻底清洁 可行不啊 谢谢啦
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金戈铁马你要等我
5楼2014-01-01 16:43:41
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 战斗节能 at 2014-01-01 11:03:22
可以问下你种子是摇了多少小时。个人觉得你这可能是试管摇的种子就已经感染了慢性的。烈性的一般在十几分钟到半小时就拜拜了！

之前已经把锥形瓶180°C干烤过4h，但是这次摇菌又出现同样的问题 ；还有 我用试管摇菌时 不是所有的都能长起来 部分试管是澄清的 底部都是碎片 是不是我的菌种也被污染了啊 ；昨天重新做了一次转化 结果今天挑菌时  挑了12个 只有五个试管长起来了 真是汗啊~
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金戈铁马你要等我
6楼2014-01-01 16:48:48
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 大鱼小心 at 2014-01-02 14:36:03
染了噬菌体，什么酒精，84都不起作用，接种是注意也没什么效果，工程出现这种情况至少要停产三个月的，说不定你的种子都已经有噬菌体了，只是没爆发而已，现在怎么说呢，实验室都不注意，其实不管从环保安全角度考虑 ...

啊 不会那么惨吧 ~我做实验一直没有顺利过 刚刚连接做了三个月 好不容易连上了 可以提蛋白了 菌还摇不起来了 什么人品啊~除了停工 没有别的办法了啊
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金戈铁马你要等我
9楼2014-01-03 12:51:24
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 大鱼小心 at 2014-01-03 12:59:24
学习的时候多犯错误是好事，代价低，就是多花时间而已。也不是没办法，但我没用过，干扰素试试...

好歹让我顺利一回啊 ~这一年多差不多都是这么反反复复的 可是我从来没有放弃过 越挫越勇 越勇越挫~
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金戈铁马你要等我
11楼2014-01-04 10:53:19
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