应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于噬菌体随机肽库的一些问题，急求~
141/2返回列表12下一页
查看: 3410  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于噬菌体随机肽库的一些问题，急求~

我最近在做噬菌体随即肽库的筛选，我用的是NEB的12肽库，筛选完一轮后测滴度没有蓝白斑，只是整版发蓝，不是稀释倍数低的情况，板上什么斑都没有，所有东西都重新灭菌了，不知道什么原因，谢谢，急求~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

噬菌体展示 噬菌体库筛选 实验交流

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
每天都在做实验~研究。。。
1楼 2011-05-08 15:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)
我们是自己构建的合成库，和你们的筛选方法也不一样，只能帮顶一下了
赞一下 回复此楼
行到水穷处，坐看云起时！
2楼2011-05-09 14:17:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by hflf at 2011-05-09 14:17:12:
我们是自己构建的合成库，和你们的筛选方法也不一样，只能帮顶一下了

你们筛后的检测滴度的方法是什么？我换别的方法也可以。。。
赞一下 回复此楼
每天都在做实验~研究。。。
3楼2011-05-10 20:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

wxh_0309(金币+5): 谢谢 2011-05-16 09:32:56
helper phage滴度测定用的top agarose和TG1混了helper phage倒在2*YT上，数噬菌斑；重组的phage和TG1混了倒在含氨苄的2*YT上，数单克隆。
赞一下 回复此楼
行到水穷处，坐看云起时！
4楼2011-05-11 10:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)
我是买的随机肽库，没有helper phage.
赞一下 回复此楼
每天都在做实验~研究。。。
5楼2011-05-16 09:30:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by hflf at 2011-05-11 10:21:21:
helper phage滴度测定用的top agarose和TG1混了helper phage倒在2*YT上，数噬菌斑；重组的phage和TG1混了倒在含氨苄的2*YT上，数单克隆。

我买的是随机肽库，没有helper phage。
赞一下 回复此楼
每天都在做实验~研究。。。
6楼2011-05-16 09:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)
那应该就是直接把你的库稀释，然后感染TG1再涂在含氨苄的2*YT上吧，应该和我们自己构建的库检测滴度差不多吧
赞一下 回复此楼
行到水穷处，坐看云起时！
7楼2011-05-17 17:43:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqh2912

新虫 (初入文坛)
我用的也是NEB12肽，最近也是这个问题，稀释到11此方后还是这样。老师让稀释到15此方后看看。建议你可以做一个4,6,8.。。16的倍数稀释彻底排除稀释倍数问题。
赞一下 回复此楼
8楼2011-06-28 09:43:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fangxianjun

铁虫 (初入文坛)
直接稀释后没，差不多到109-1010左右，
赞一下 回复此楼
9楼2011-07-21 17:00:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fangxianjun

铁虫 (初入文坛)
另外，宿主菌每次用的时候，最好重新挑单菌，我是做t7的。
赞一下 回复此楼
10楼2011-07-21 17:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wxh_0309 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学学硕求调剂 +5 太想进步了0608 2026-03-16 5/250 2026-03-16 14:11 by xwxstudy
[考研] 材料专硕306英一数二 +4 z1z2z3879 2026-03-16 4/200 2026-03-16 13:53 by laoshidan
[考研] 化学工程321分求调剂 +7 大米饭！ 2026-03-15 7/350 2026-03-16 10:25 by 了了了了。。
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 材料专硕326求调剂 +4 墨煜姒莘 2026-03-15 4/200 2026-03-15 11:02 by dyw
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭