24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3474  |  回复: 13

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于噬菌体随机肽库的一些问题,急求~

我最近在做噬菌体随即肽库的筛选,我用的是NEB的12肽库,筛选完一轮后测滴度没有蓝白斑,只是整版发蓝,不是稀释倍数低的情况,板上什么斑都没有,所有东西都重新灭菌了,不知道什么原因,谢谢,急求~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

噬菌体展示 噬菌体库筛选 实验交流

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

每天都在做实验~研究。。。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)

我们是自己构建的合成库,和你们的筛选方法也不一样,只能帮顶一下了
行到水穷处,坐看云起时!
2楼2011-05-09 14:17:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by hflf at 2011-05-09 14:17:12:
我们是自己构建的合成库,和你们的筛选方法也不一样,只能帮顶一下了

你们筛后的检测滴度的方法是什么?我换别的方法也可以。。。
每天都在做实验~研究。。。
3楼2011-05-10 20:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

wxh_0309(金币+5): 谢谢 2011-05-16 09:32:56
helper phage滴度测定用的top agarose和TG1混了helper phage倒在2*YT上,数噬菌斑;重组的phage和TG1混了倒在含氨苄的2*YT上,数单克隆。
行到水穷处,坐看云起时!
4楼2011-05-11 10:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

我是买的随机肽库,没有helper phage.
每天都在做实验~研究。。。
5楼2011-05-16 09:30:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by hflf at 2011-05-11 10:21:21:
helper phage滴度测定用的top agarose和TG1混了helper phage倒在2*YT上,数噬菌斑;重组的phage和TG1混了倒在含氨苄的2*YT上,数单克隆。

我买的是随机肽库,没有helper phage。
每天都在做实验~研究。。。
6楼2011-05-16 09:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)

那应该就是直接把你的库稀释,然后感染TG1再涂在含氨苄的2*YT上吧,应该和我们自己构建的库检测滴度差不多吧
行到水穷处,坐看云起时!
7楼2011-05-17 17:43:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqh2912

新虫 (初入文坛)

我用的也是NEB12肽,最近也是这个问题,稀释到11此方后还是这样。老师让稀释到15此方后看看。建议你可以做一个4,6,8.。。16的倍数稀释彻底排除稀释倍数问题。
8楼2011-06-28 09:43:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fangxianjun

铁虫 (初入文坛)

直接稀释后没,差不多到109-1010左右,
9楼2011-07-21 17:00:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fangxianjun

铁虫 (初入文坛)

另外,宿主菌每次用的时候,最好重新挑单菌,我是做t7的。
10楼2011-07-21 17:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wxh_0309 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考博] 求博导|生物质基多孔碳/超级电容方向,已有相关成果,寻能源材料/碳材料方向老师 +3 猪猪人Zzz 2026-04-12 3/150 2026-04-17 19:10 by 阳阳阳^_^
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 335求调剂 +20 想上岸呀!! 2026-04-12 23/1150 2026-04-17 10:50 by cuisz
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考博] 申博自荐 +3 Linxia林夏 2026-04-13 3/150 2026-04-16 12:55 by 墨荷之露
[考研] 327求调剂 +26 Xxjc1107. 2026-04-13 29/1450 2026-04-16 10:52 by Espannnnnol
[考研] 279学硕食品专业求调剂院校 20+7 孤独的狼爱吃羊 2026-04-12 29/1450 2026-04-16 09:00 by screening
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 调剂结束 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
信息提示
请填处理意见