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[求助]
双荧光结果求助 已有2人参与
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| 我们组做了质粒和mimics 的共转实验，293A细胞，12孔板，NC质粒+NC mimics 、野生型质粒+目的mimics 、突变型质粒+目的mimics。结果野生型双荧光结果发现比值比NC组要高，突变型要比NC组要低，这种结果正常么？怎么解释？已经重复了3板，趋势是一致的，提高质粒浓度后也是这样的结果，菜鸟求助。 |
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gyesang
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4楼2013-12-25 11:56:39
running113
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3楼2013-12-25 11:00:09
【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-01-05 15:16:33
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-01-05 15:16:33
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我最近也在做microrna的荧光素酶试验 我是这么理解的，双荧光素酶的实验是用来检测基因3‘utr端与microrna的结合 你构建的reporter质粒荧光素基因3’端含有预测结合的那一段碱基序列 如果与microrna确实可以互补，那么荧光素酶被抑制表达 看一些microrna方面的文献想必你也发现，如果确实有binding，野生型应该是荧光减弱，而突变型应该有个rescue，比野生高 你这个结果反了 不过难以置信的是，我和你得出了类似的难以解释的结果吗，是反的，而且我已经重复四次。。。 |
5楼2014-01-05 11:23:16
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