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小小幺幺

新虫 (初入文坛)

[求助] 双荧光结果求助 已有2人参与

我们组做了质粒和mimics 的共转实验,293A细胞,12孔板,NC质粒+NC mimics 、野生型质粒+目的mimics 、突变型质粒+目的mimics。结果野生型双荧光结果发现比值比NC组要高,突变型要比NC组要低,这种结果正常么?怎么解释?已经重复了3板,趋势是一致的,提高质粒浓度后也是这样的结果,菜鸟求助。
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running113

木虫 (著名写手)

不知你是要证明什么?

[ 发自小木虫客户端 ]
SCI我来了!!!
2楼2013-12-24 19:04:00
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小小幺幺

新虫 (初入文坛)

我只想看看野生和突变在对结合这个microRNA 有什么影响

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-12-25 11:00:09
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-25 12:13:05
能否贴出你的实验结果,到底低或者高多少,这种低和高是否具有统计学差异?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-12-25 11:56:39
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jkjr111614

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励交流! 2014-01-05 15:16:33
我最近也在做microrna的荧光素酶试验
我是这么理解的,双荧光素酶的实验是用来检测基因3‘utr端与microrna的结合
你构建的reporter质粒荧光素基因3’端含有预测结合的那一段碱基序列
如果与microrna确实可以互补,那么荧光素酶被抑制表达
看一些microrna方面的文献想必你也发现,如果确实有binding,野生型应该是荧光减弱,而突变型应该有个rescue,比野生高
你这个结果反了
不过难以置信的是,我和你得出了类似的难以解释的结果吗,是反的,而且我已经重复四次。。。
5楼2014-01-05 11:23:16
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