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克隆涂平板37℃培养一夜之后,菌落密密麻麻并且特别小是什么原因?
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柠檬可乐星
新虫
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(幼儿园)
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帖子: 250
在线: 48.1小时
虫号: 2414119
[交流]
克隆涂平板37℃培养一夜之后,菌落密密麻麻并且特别小是什么原因?
如题,我做克隆,涂完平板之后37℃过夜培养,长出的菌落都是很均一,密度很大,并且特别特别小的,做了两次了,都是这样,请问会是什么原因啊?
(我转化用的感受态是40-50ul,加800ul 不加氨苄的LB培养基或者是SOC,摇菌一个小时,4000rpm 离心1min,移走700ul上清液,第一次是吧剩下的100ul都涂板了,长得菌落太密,第二次用了50ul涂板,用的氨苄是50ug/ml终浓度。两次的摇菌一小时离心完之后都能看到很明显的沉淀,我在想是不是菌液密度太大导致的菌落长不好呢?)
求高手指点,有哪位做这一步效果比较好的,处理方法能告知的将感激不尽!
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1楼
2013-12-18 09:01:22
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gao-feng
铁杆木虫
(著名写手)
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(小学生)
金币: 5187
帖子: 1535
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虫号: 985874
你的氨苄失效了。
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14楼
2013-12-19 09:23:18
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判官小艾
木虫
(正式写手)
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虫号: 1740244
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
柠檬可乐星: 金币+1
2013-12-19 20:41:01
你可以将收集后的菌体稀释成不同的倍数,然后再涂版,50微升
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2楼
2013-12-18 09:05:36
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jinwei331
至尊木虫
(文坛精英)
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在线: 1170.4小时
虫号: 2085922
…………………………
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3楼
2013-12-18 09:45:03
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deguohan
至尊木虫
(职业作家)
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(初中生)
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虫号: 2575509
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+1, 感谢发帖应助,帮助虫子
2013-12-18 18:06:04
原因可能有2个:一、估计是时间太短了,延长培养时间即可长大;二、也可能是长了杂菌了,建议用抗生素筛选(选的克隆载体抗该抗生素)。
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6楼
2013-12-18 10:17:29
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