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whh198901

铜虫 (小有名气)

[求助] 柱压高,求助!!!!! 已有5人参与

实验室一根Bio-Rad  HPX-87H离子交换柱子,买了一年多,我接手用才几个月,现在柱压比较高,在流速为0.6ml/min,55℃下使用已经超过极限值1500psi,测的是产丁二酸的发酵液,是在别人使用反向柱的设备上使用的,没有保护住。样品稀释20倍并经过0.22μm膜过滤,流动相为0.5mM硫酸,也经过0.22μm膜过滤,总之保证样品以及流动相处理的没有问题。现在按照说明书上的方法,正冲反冲都没有效果。急急急求高手,现在该怎么办??导师说他们都是用3.4年的,我这才用了几个月,好坑啊!!!
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jh9689

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
柱子的堵塞是一个非常复杂的问题,因为不知道什么东西堵的,所以建议楼主多用几种溶剂冲洗一下,从极性强的到极性弱的,可以低流速过夜冲,进过多种溶剂冲洗一般是能解决问题的,冲的时候可以反冲,但不要一会正过来,一会翻过来,坚持一个方向。如果实在不行可以把柱子拆开,小心的把柱头的筛板取下来超声或者换一个好的,做这一步的时候一定要小心,坚决不能碰填料,否则柱子就塌了,彻底的废了。
做分析的,大家多交流
15楼2013-12-17 19:56:08
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普通回帖

whh198901

铜虫 (小有名气)

急,在线等!!
2楼2013-12-16 16:46:24
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swallow13

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

3楼2013-12-16 16:51:53
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来分析版~ 2013-12-17 10:50:23
把色谱柱卸掉,连接双通,看看压力是否是系统产生。如果不是,那么就是色谱柱的问题
4楼2013-12-16 16:56:07
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whh198901

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by swallow13 at 2013-12-16 16:51:53
试试用不同的有机溶剂来冲 DMF和DMSO都是不错的选择 冲的时候记住不要接检测器 防止污染流通池

用过5%,以及30%乙腈于5mM硫酸中冲过,没什么效果, DMF和DMSO可以吗?
5楼2013-12-16 16:58:00
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whh198901

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-12-16 16:56:07
把色谱柱卸掉,连接双通,看看压力是否是系统产生。如果不是,那么就是色谱柱的问题

不是系统的问题,还换过系统试过
6楼2013-12-16 16:58:58
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by whh198901 at 2013-12-16 16:58:58
不是系统的问题,还换过系统试过...

那就是色谱柱的问题,可以使用乙腈冲洗,然后再跟换到流动相比例
7楼2013-12-16 17:10:23
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swallow13

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

8楼2013-12-16 18:01:52
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whh198901

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by swallow13 at 2013-12-16 18:01:52
DMSO和DMF洗脱能力远强于乙腈 我们的制备柱污染都是用这个来洗的 洗的时候流速调低一点...

我不知道我们的柱子能不能用这种溶液额?
9楼2013-12-16 19:19:32
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miyanjingle

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先换个正常的柱子,看是柱子的问题还是系统的问题,如果是柱子有问题,先用乙腈冲柱子,在按照说明配相关的溶液走液相看看
10楼2013-12-16 23:21:15
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