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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 柱压高，求助！！！！！
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whh198901

铜虫 (小有名气)

[求助] 柱压高，求助！！！！！ 已有5人参与

实验室一根Bio-Rad  HPX-87H离子交换柱子，买了一年多，我接手用才几个月，现在柱压比较高，在流速为0.6ml/min，55℃下使用已经超过极限值1500psi，测的是产丁二酸的发酵液，是在别人使用反向柱的设备上使用的，没有保护住。样品稀释20倍并经过0.22μm膜过滤，流动相为0.5mM硫酸，也经过0.22μm膜过滤，总之保证样品以及流动相处理的没有问题。现在按照说明书上的方法，正冲反冲都没有效果。急急急求高手，现在该怎么办？？导师说他们都是用3.4年的，我这才用了几个月，好坑啊！！！
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1楼 2013-12-16 16:43:49
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jh9689

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
柱子的堵塞是一个非常复杂的问题，因为不知道什么东西堵的，所以建议楼主多用几种溶剂冲洗一下，从极性强的到极性弱的，可以低流速过夜冲，进过多种溶剂冲洗一般是能解决问题的，冲的时候可以反冲，但不要一会正过来，一会翻过来，坚持一个方向。如果实在不行可以把柱子拆开，小心的把柱头的筛板取下来超声或者换一个好的，做这一步的时候一定要小心，坚决不能碰填料，否则柱子就塌了，彻底的废了。
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做分析的，大家多交流
15楼2013-12-17 19:56:08
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普通回帖

whh198901

铜虫 (小有名气)
急，在线等！！
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2楼2013-12-16 16:46:24
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swallow13

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2013-12-16 16:51:53
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来分析版~ 2013-12-17 10:50:23
把色谱柱卸掉，连接双通，看看压力是否是系统产生。如果不是，那么就是色谱柱的问题
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4楼2013-12-16 16:56:07
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whh198901

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by swallow13 at 2013-12-16 16:51:53
试试用不同的有机溶剂来冲 DMF和DMSO都是不错的选择 冲的时候记住不要接检测器 防止污染流通池

用过5%，以及30%乙腈于5mM硫酸中冲过，没什么效果， DMF和DMSO可以吗？
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5楼2013-12-16 16:58:00
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whh198901

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-12-16 16:56:07
把色谱柱卸掉，连接双通，看看压力是否是系统产生。如果不是，那么就是色谱柱的问题

不是系统的问题，还换过系统试过
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6楼2013-12-16 16:58:58
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by whh198901 at 2013-12-16 16:58:58
不是系统的问题，还换过系统试过...

那就是色谱柱的问题，可以使用乙腈冲洗，然后再跟换到流动相比例
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7楼2013-12-16 17:10:23
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swallow13

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2013-12-16 18:01:52
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whh198901

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by swallow13 at 2013-12-16 18:01:52
DMSO和DMF洗脱能力远强于乙腈 我们的制备柱污染都是用这个来洗的 洗的时候流速调低一点...

我不知道我们的柱子能不能用这种溶液额？
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9楼2013-12-16 19:19:32
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miyanjingle

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先换个正常的柱子，看是柱子的问题还是系统的问题，如果是柱子有问题，先用乙腈冲柱子，在按照说明配相关的溶液走液相看看
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10楼2013-12-16 23:21:15
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