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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于酶的固定化
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叽里呱啦

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于酶的固定化 已有2人参与

我做的酶的固定化，用的氨基型载体。第一，先把载体按一定比例用PH8.0 、0.1M磷酸缓冲液搅拌清洗1h。第二，抽干树脂，加入一定量的2%戊二醛磷酸缓冲液交联1h。第三，抽干，用蒸馏水清洗干净残留的戊二醛。第四，酶液与树脂按一定比例混合，于25℃下振荡18h。第五，将吸附过的树脂用蒸馏水清洗3遍，抽干。得到的固定化树脂使用第二次酶活就下降了，每使用一次，活力下降很多，不能循环使用，不知道哪位大神能给些解决的办法，不胜感激！最好做过氨基酸氧化酶的！
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1楼 2013-12-16 15:38:50
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叽里呱啦

铜虫 (初入文坛)
虽然没有解决我的难题，但还是很感谢你提供的这些东西，我再看看吧
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2楼2013-12-17 08:31:52
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杏林丫丫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主问题解决了吗？我也准备开始做固定化酶，但是毫无头绪，想问一下固定化载体该怎么选择？是不是每个酶都可以用不同的固定化方法来做？
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希望~失望~绝望~希望
3楼2013-12-25 09:11:06
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叽里呱啦

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 杏林丫丫 at 2013-12-25 09:11:06
请问楼主问题解决了吗？我也准备开始做固定化酶，但是毫无头绪，想问一下固定化载体该怎么选择？是不是每个酶都可以用不同的固定化方法来做？

固定化载体挺多的，我用的是树脂，不同的酶适用的载体不一样，我们可以探讨下，2681361739
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4楼2013-12-31 09:14:25
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huayaoE

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你可以换换别的型号的载体或者环氧的载体试试，同时考虑一下你的酶本身的稳定性是不是不好？
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努力努力努力！！
5楼2014-02-11 10:35:43
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xuefeiwin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 叽里呱啦 at 2013-12-31 09:14:25
固定化载体挺多的，我用的是树脂，不同的酶适用的载体不一样，我们可以探讨下，2681361739...

楼主 我也准备在说着快，酶的活性下降是正常现象
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6楼2015-05-08 13:26:29
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奥利哈哈刚

新虫 (初入文坛)
有没有考虑过反应体系会对酶活降低造成影响？或者你固定不牢固，第一次使用完后清洗有蛋白洗出？
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7楼2016-05-19 16:49:02
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