24小时热门版块排行榜    

查看: 3928  |  回复: 3

ivyvampire

新虫 (正式写手)

[求助] 线性化质粒转染有时候表达有时候不表达,不稳定是什么原因?

如题,同一批大抽的质粒,第一次线性化之后瞬时转染细胞,表达很好,便用于电转了
第二次用这个质粒又线性化了,再拿去瞬转表达就很低,注:有阳性对照,阳性对照表达是正常的,所以可以排除细胞和操作方面的原因。
其它线性化的质粒也没有问题,就这个质粒老出问题。
这个转染是重链和轻链两个质粒一起转的。
不知道有没有高人遇到过这情况。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海绵宝宝心

新虫 (初入文坛)

你好 我们也是电转 问一下线性化质粒就是将质粒单酶切然后割胶回收就可以转染了吗?我们用的质粒含有抗药基因 单酶切后转染是否需要加药

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-05-31 22:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ivyvampire

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 海绵宝宝心 at 2017-05-31 22:31:37
你好 我们也是电转 问一下线性化质粒就是将质粒单酶切然后割胶回收就可以转染了吗?我们用的质粒含有抗药基因 单酶切后转染是否需要加药

质粒用酒精离心消毒,在安全柜里吸水后晾干,重悬就可以用了,如果要筛东西,肯定是要加药的

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-06-01 22:08:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

查无此人lyp

新虫 (正式写手)

我也遇到了这个问题,难道真的是偶然事件吗?我也期待着楼主的问题早日解决
4楼2018-01-04 16:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ivyvampire 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见