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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » HPLC测含量摸索流动相的问题
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王文静341

新虫 (初入文坛)

[交流] HPLC测含量摸索流动相的问题

求助：HPLC同时测定复方中两种成分，分别是碱性物质和酸性物质，用过甲醇/乙腈-酸水、乙腈-磷酸盐流动相，但分离效果不好，请问流动相我接下来该采用什么思路摸索，哪位大神给建议，万分感激！
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1楼 2013-12-06 10:30:58
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News

专家顾问 (职业作家)
也可以先将pH设定为2.0~2.5左右，抑制色谱柱内游离硅羟基导致的次级保留，

常规的流动相就是10mM~50mM的磷酸盐（pH2.5左右）：乙腈，先走梯度确定出峰的流动相强度，可在更改为相似强度的等度洗脱。 前提也是得保证样品在流动相中的稳定性。
含量的方法应该还好弄吧，最头大的是有关物质的方法开发。
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17楼2013-12-07 08:51:45
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)
★
王文静341: 金币+1 2013-12-06 16:41:00
乙腈-磷酸盐流动相，加点磷酸调一下pH试试看。酸性、碱性物质，调pH是比较好的选择，不行再试试梯度。
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2楼2013-12-06 10:39:42
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helious

银虫 (小有名气)
★
王文静341: 金币+1 2013-12-06 16:41:49
你用的这两种物质是不是极性特别大啊，如果是的话就得在色谱柱上下功夫了，换个氨基柱估计会好点，方法上估计没什么突破，一般也就是缓冲盐-甲醇梯度洗脱
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3楼2013-12-06 10:43:00
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顾莫柔

金虫 (正式写手)
★
王文静341: 金币+1 2013-12-06 16:41:27
首先，楼主的酸性物质和碱性物质极性相差有多大？
极性大，可考虑氨基柱；
不大，可直接用磷酸盐缓冲液（PH4.0至6.5)-乙腈。
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4楼2013-12-06 10:53:45
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