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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单克隆抗体亚克隆的次数
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蓝默儿

金虫 (小有名气)

[交流] 单克隆抗体亚克隆的次数

想交流下单克隆抗体制备过程中的亚克隆次数：
1.如果第二次亚克隆，ELISA检测单集落孔全为阳性，是否进行第三次亚克隆。
进行第三次亚克隆筛选杂交瘤细胞会更稳定么，还是杂交瘤细胞容易丢失，细胞逐代养下去，感觉阳性株也是容易丢失的么？
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1楼 2013-12-04 14:20:13
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raohui

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你们亚克隆是怎样具体操作的？我每次亚几乎都是多克隆，单克隆太少，有什么方法可以高效的亚出单个单克隆吗？请指教？
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7楼2014-07-25 14:00:27
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Endless100

木虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-04 18:22:17
最好还是进行三次亚克隆，因为这也是筛选稳定细胞株的过程
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2楼2013-12-04 17:31:40
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蓝默儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Endless100 at 2013-12-04 17:31:40
最好还是进行三次亚克隆，因为这也是筛选稳定细胞株的过程

第二次亚克隆全部孔都为阳性，且单集落孔有40个，文献上也说，如果稳定进行第三次亚克隆，但杂交瘤在培养的过程中也不是容易染色体丢失？有的时候感觉处理是矛盾的。我是二亚克隆全为阳性，也进行三亚了，也是阳性，但不知道什么原因，三亚的细胞没长起来，长着长着就飘了，然后，脱落，细胞萎缩死亡，先头担心是污染，但几天细胞溶液上清没有浑浊，镜下也不像细菌污染。
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3楼2013-12-06 09:41:24
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琪琪a0716

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也正在做单抗，老板要求我做四次亚克隆才可以！
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4楼2013-12-17 16:14:35
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