| 查看: 3019 | 回复: 3 | ||
[求助]
关于DEAE-52纤维素洗脱剂的问题 已有1人参与
|
| 大家好，我在看关于多糖的DEAE-52的纯化过程中，洗脱剂的问题不是很明白，我看有的用磷酸盐缓冲液的，有的用NaCl Tris-HCl缓冲液的，有的用醋酸盐的、有的用碳酸钠的、有的用氢氧化钠的、我看大多数用的最多的是不同梯度的NaCl进行洗脱，搞不懂我自己要用哪种了,是根据自己实验室的资源来选择呢还是先做下预实验摸索一下哪种好呢？要做预实验的话好麻烦呀。还有大家洗脱剂的用量是怎么确定的？我看文献上有的说用量为柱体积的2-4倍，还是每管都用萘酚-硫酸检测检测，要是没有紫色的环就说明洗脱干净了再换下一种洗脱剂？要不用苯酚-硫酸检测测其OD值，很小的话就换下一种洗脱剂？突然还有一个问题：收集峰位后，浓缩后就真空冷冻干燥吗？那里面的NaCl怎么除去呀？否则它会结晶的呀，麻烦做过的有经验的师兄师姐还有老师们给解答一下，非常感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有25人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有8人回复
-
分享一下我之前已中青C的计划书的filecode
已经有4人回复
-
职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊
已经有3人回复
-
为什么网上很多人说本周 12号出结果
已经有6人回复
-
听说今天filecode变了
已经有49人回复
-
帮忙看看fileCode
已经有12人回复
-
FileCode能看出啥？
已经有17人回复
-
奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样
已经有6人回复
-
filecode
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱
已经有3人回复
- DEAE-纤维素的洗脱及再生
已经有7人回复
- DEAE-52洗脱液离子强度与产物之间的关系
已经有5人回复
- DEAE-纤维素阴离子交换树脂纯化多糖，柱子重生
已经有8人回复
- DEAE-纤维素的预处理方式
已经有10人回复
- DEAE-52纤维素分离多糖
已经有3人回复
- DEAE-52溶胀性求助
已经有23人回复
- DEAE-52纤维素柱求助
已经有22人回复
- DEAE-纤维素52用NaCl冲洗，为什莫会冲下大量黄色液体？？
已经有6人回复
- 怎样判断DEAE-纤维素柱上样超载？急求！！
已经有8人回复
- DEAE-52纤维素能否用DEAE Sepharose fast flow替换使用呢？
已经有7人回复
- 吸附剂的洗脱与再生问题
已经有4人回复
- 梯度过柱法的洗脱剂的选择
已经有6人回复
- DEAE sephadex A-25
已经有5人回复
- 多糖能采用100目的硅胶纯化吗？
已经有8人回复
- 怎么样选择层析柱、DEAE纤维素型号
已经有7人回复
- 离子交换层析（deae-纤维素）出峰差异很大（有图谱）
已经有26人回复
- DEAE纤维素的柱体积怎么计算
已经有3人回复
- 【求助】大孔树脂洗脱剂的问题
已经有11人回复
- 【求助】求助—分配柱色谱的洗脱剂的问题
已经有10人回复
- 【求助】硅胶柱洗脱剂的选择
已经有17人回复
- DEAE纤维素装柱时流速超慢，怎么办
已经有13人回复
神雕哥
木虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 3430.9
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 436
- 在线: 116.8小时
- 虫号: 1405428
- 注册: 2011-09-17
- 性别: GG
- 专业: 药物学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| 首先洗脱剂，我觉得用NaCl就行，DEAE-52主要是分离中性多糖和酸性多糖，一般洗脱液只要能把结合在DEAE-52上的酸性多糖换洗下来就行。我当时用0.1，0.3,0.5,0.7,0.9M的Nacl进行的阶段性洗脱，流速1mL/min，5mL一管，采用苯酚-硫酸法在490nm下测定A，绘制洗脱曲线。至于具体洗几个柱体积，这的根据你样品性质进行预实验。我当时都是洗的4个柱体积。然后根据结果再确定每个梯度具体洗几个柱体积。收集峰位后， 浓缩，透析除盐，然后再冷冻干燥，这样里面得盐就没了，冻干后的样品会很膨松。祝你实验成功 |
chong//虫2楼2013-12-04 09:19:00
3楼2013-12-04 17:56:36
4楼2018-09-20 10:12:16
