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晨000000晨

金虫 (小有名气)

[求助] 菌种含量如何确定求助

各位大神,取菌种3一14代营养琼脂斜面新鲜培养物(18h-24h),用 0.03mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)洗下,稀释成含菌量为 1X10^7cfu/mL--1X10^8cfu/mI的菌悬液。
这个怎么办到呢?我从培养基中取多少菌种混合物加到多少PBS溶液中,能够满足含菌量为 1X10^7cfu/mL--1X10^8cfu/mI呢?新手完全不知道怎么办,希望指点迷经
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liurechen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
晨000000晨: 金币+8, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2013-12-03 20:22:12
首先需要稀释的斜面种子肯定不止一支吧,先取其中一支,用定量的PBS洗下,然后用PBS做梯度稀释,选取连续的几个梯度做菌落计数,找到合适的稀释梯度;
然后,再取一支斜面种子,稀释到上次确定的浓度,就可以获得你所需要浓度的菌悬液了(当然,为保险起见可以除目标梯度外再取上下两个浓度)。
相争两蜗角,所得一牛毛。 且灭嗔中火,休磨笑里刀。
6楼2013-12-03 13:31:36
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查看全部 14 个回答

pfeng00

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
晨000000晨: 金币+5, 谢谢 2013-12-03 20:19:19
用缓冲液洗下后,取一部分做平板计数,余下的放4℃冰箱,细菌一般24小时就可以在平板上长出来了,再根据计数结果做稀释。绝大部分的细菌,制成菌悬液放4℃冰箱24小时一般不会失活的,我做过一种酵母菌的菌悬液4℃保藏,1个礼拜后才有较大数量的失活。
2楼2013-12-02 20:10:37
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倾听花开

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
晨000000晨: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2013-12-03 20:20:06
你可以去计数啊,平板计数可以,用血球计数板也可以啊,自己慢慢求就行了

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2013-12-03 07:30:17
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晨000000晨

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pfeng00 at 2013-12-02 20:10:37
用缓冲液洗下后,取一部分做平板计数,余下的放4℃冰箱,细菌一般24小时就可以在平板上长出来了,再根据计数结果做稀释。绝大部分的细菌,制成菌悬液放4℃冰箱24小时一般不会失活的,我做过一种酵母菌的菌悬液4℃保 ...

您好,我那个是固体斜面培养基,用PBS冲洗下,可以取一部分做平板计数,但是下次我怎么定量呢?每次都这样感觉有点麻烦
4楼2013-12-03 09:22:15
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