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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 设计引物装载体 求高手
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箫箫客

银虫 (小有名气)

[求助] 设计引物装载体 求高手

设计引物一定要保证是3的倍数吗？如果不是3的倍数会不会载入载体后会发生移码吗？一般把目的片段装入载体时会考虑载体上的移码而不会考虑获得的PCR序列，到底要不要考虑呀，突然想到这个问题，有点头大
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1楼 2013-11-26 21:34:51
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zz53qq53

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不一定，一般有12碱基与模板保持配对，引物就会稳定结合在模板上，不会出现位置偏移
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8楼2013-11-27 16:24:21
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sinoer

铜虫 (小有名气)
gyesang: 屏蔽内容, 论坛没有广告！ 2013-11-27 01:40:08
本帖内容被屏蔽
2楼2013-11-26 23:16:13
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zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不一定是3的倍数；
移码与否与是否是3的倍数无关；
一般不要考虑，都会是IN FRAME;极个别情况要考虑是否IN FRAME
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3楼2013-11-27 01:20:22
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
箫箫客: 金币+1, ★有帮助 2013-12-01 11:48:36
引物的碱基数不一定是3的倍数啊，在你装完载体后，从你基因前的第一个ATG数到你基因ATG的时候，一定要是3的倍数，否则就移码，你装完载体，可以电子翻译一下试试看看你这么克隆是否会造成移码
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-11-27 01:42:46
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