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细胞融合问题请教?
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简单HE认真
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细胞融合问题请教?
各位虫友,你们好!我最近做细胞融合总是遇到污染,请教了一些有经验的人,说是支原体或是黑胶虫,而且一般都是sp 20出现污染,很困惑不知该如何解决,请各位赐教。
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2013-11-09 21:06:36
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2013-11-18 08:45:39
出现这种情况很不好解决,一方面对细胞室进行全面清洁,查看通风净化系统是不是该换了?另一方面购买治疗支原体的药物,需要治疗几个星期看细胞形态有没有恢复。祝好运!
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2013-11-10 21:15:15
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2楼
:
Originally posted by
yxx107
at 2013-11-10 21:15:15
出现这种情况很不好解决,一方面对细胞室进行全面清洁,查看通风净化系统是不是该换了?另一方面购买治疗支原体的药物,需要治疗几个星期看细胞形态有没有恢复。祝好运!
...
谢谢,再请问一下这种情况,有一些比较重要的细胞,将就冻存,3个月有复苏的希望吗;还有我们的sp2/0用了很久了,有必要再买进新的吗?
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3楼
2013-11-13 12:07:00
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3楼
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简单HE认真
at 2013-11-13 12:07:00
谢谢,再请问一下这种情况,有一些比较重要的细胞,将就冻存,3个月有复苏的希望吗;还有我们的sp2/0用了很久了,有必要再买进新的吗?...
如果细胞状态已经不好,再进行冻存的话,后面复苏时细胞状态也不会好,还有可能复苏不起来。
细胞室清洁必须打扫好,要不然即使买进新的细胞后面还是很容易就被污染的。因为支原体如果出现的话很难被清除干净的。
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4楼
2013-11-13 14:13:44
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2013-11-18 08:45:57
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3楼
:
Originally posted by
简单HE认真
at 2013-11-13 12:07:00
谢谢,再请问一下这种情况,有一些比较重要的细胞,将就冻存,3个月有复苏的希望吗;还有我们的sp2/0用了很久了,有必要再买进新的吗?...
sp2/0如果你觉得很久了,你可以用8-AG筛选一下,使你的sp2/0细胞对HAT更加敏感,完成后再进行亚克隆一下,冻存好几批备用就OK了,我之前有短时间也是融合的很不好,也遇到污染,首先将细胞房进行了彻底的清洁消毒,感觉有污染的细胞,果断点丢掉,然后再重新养细胞,SP2/0如上处理后,这样再融合就很好了,基本维持到现在没出过问题。希望对你有用。
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2013-11-18 05:40:48
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支原体可以检测,大家说的黑胶虫我个人觉得是细胞状态较差,一些碎片之类的东西,优化培养条件会变没有的
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6楼
2013-11-18 08:30:34
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