应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞融合融合率好低
111/2返回列表12下一页
查看: 6616  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

sisifly

新虫 (小有名气)

[求助] 细胞融合融合率好低

我上周五做了次细胞融合。。今天看了融合率好低不到10%。。我用的是自己配的PEG4000，50%。。。我融合时候作用时间有点长，，用了两分钟。。。我同学上次用了一分钟她融合率差不多60%。。。可是也不高啊。。各位大侠是怎么做到那个高的融合率的？。。。我身心憔悴啊。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-16 14:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lxh311

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
adslye(金币+3): 感谢应助~祝顺利！ 2011-08-12 10:26:25
silicare(BioEPI+1): 2011-08-12 16:00:26
引用回帖:
Originally posted by sisifly at 2011-05-16 14:14:16:
我上周五做了次细胞融合。。今天看了融合率好低不到10%。。我用的是自己配的PEG4000，50%。。。我融合时候作用时间有点长，，用了两分钟。。。我同学上次用了一分钟她融合率差不多60%。。。可是也不高啊。。各位大 ...

看了你的描述，我大概知道原因了，以下几点：
1.PEG最好是购买Sigma的，这是很关键的融合剂，特别是生手，我实在不敢恭维你配置的效果，做到熟练了再考虑自己配PEG；
2.PEG2000,4000,6000，分子量越大，越稠，毒性也越强，你要选择合适分子量的PEG，买sigma的，一般用0.8ml就够了；
3.融合时间的控制，一般为90s，不能太长，否则细胞因毒性大，而出现死亡，融合完，立即用1640培养基（不加FBS）终止融合，5min，前2min同融合时速度，后3min逐渐加快；
4.SP2/0的状态也一定要好，不然效率也不高；
5.本人只是有限，其它请其它大虾补充；
赞一下(5人) 回复此楼
心境心静
4楼2011-06-18 08:49:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢应助！祝顺利！ 2011-08-12 10:27:12
呵呵，这个问题我也碰到过。后来买了赛驰融合剂。效果非常好，做了两个单抗，两千多个孔大概有一千四百多个融合孔。只是后期筛选量大了点。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(3人) 回复此楼
8楼2011-07-30 19:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

rocky3715

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-12 10:25:31
引用回帖:
Originally posted by sisifly at 2011-05-16 14:14:16:
我上周五做了次细胞融合。。今天看了融合率好低不到10%。。我用的是自己配的PEG4000，50%。。。我融合时候作用时间有点长，，用了两分钟。。。我同学上次用了一分钟她融合率差不多60%。。。可是也不高啊。。各位大 ...

我觉得楼主最好不要自己配置PEG吧，最后购买，那样较好，而且融合的时间这个很不好说，确实是不能太长，但是不同的人做的时候又不同的习惯，其实多做几次会好点儿，第一次做融合不好是正常的
赞一下(1人) 回复此楼
我们一起加油！！！
2楼2011-06-14 22:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

juliana_zou11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-12 10:25:47
首先，融合率低不要紧，熟练了自然就高了，关键是你要能拿到东西。生手的话融合率低倒不是坏事，至少你处理的融合细胞的株数少了很多，筛选就可以精细一些
其次，PEG买的话的确不贵，尤其你是搞科研不是搞生产，就以sigma的那款来说买一盒可以做25次，一年你们能做25次？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-06-15 08:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyyy

无虫 (正式写手)
细胞状态   融合时间太长
赞一下 回复此楼
5楼2011-06-24 10:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxf2133

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

融合后的细胞怎么培养  谢谢
赞一下 回复此楼
6楼2011-07-26 23:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 鼓励新虫交流~祝顺利！ 2011-08-12 10:26:56
也碰到类似的问题，不过我们用的PEG也不是sigma的，真有那么大影响吗？
赞一下(1人) 回复此楼
Orbetterit,orenjoyit!
7楼2011-07-30 19:41:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyyy

无虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

融合时间过长,中毒了......
赞一下 回复此楼
9楼2011-08-12 10:00:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华俊

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lxh311 at 2011-06-18 08:49:13
看了你的描述，我大概知道原因了，以下几点：
1.PEG最好是购买Sigma的，这是很关键的融合剂，特别是生手，我实在不敢恭维你配置的效果，做到熟练了再考虑自己配PEG；
2.PEG2000,4000,6000，分子量越大，越稠，毒 ...

时间很早了，还是想请问一下大仙，你说的融合时间90s，包括加PEG时间吗，还是指加完peg后静置时间呢？
赞一下 回复此楼
多一份快乐少一分烦恼！
10楼2015-08-13 17:23:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 duolipu2024 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭