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细胞融合融合率好低
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| 我上周五做了次细胞融合。。今天看了融合率好低不到10%。。我用的是自己配的PEG4000，50%。。。我融合时候作用时间有点长，，用了两分钟。。。我同学上次用了一分钟她融合率差不多60%。。。可是也不高啊。。各位大侠是怎么做到那个高的融合率的？。。。我身心憔悴啊。。 |
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5楼2011-06-24 10:31:18
2楼2011-06-14 22:00:24
juliana_zou11
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3楼2011-06-15 08:43:33
lxh311
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【答案】应助回帖
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adslye(金币+3): 感谢应助~祝顺利！ 2011-08-12 10:26:25
silicare(BioEPI+1): 2011-08-12 16:00:26
adslye(金币+3): 感谢应助~祝顺利！ 2011-08-12 10:26:25
silicare(BioEPI+1): 2011-08-12 16:00:26
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看了你的描述，我大概知道原因了，以下几点： 1.PEG最好是购买Sigma的，这是很关键的融合剂，特别是生手，我实在不敢恭维你配置的效果，做到熟练了再考虑自己配PEG； 2.PEG2000,4000,6000，分子量越大，越稠，毒性也越强，你要选择合适分子量的PEG，买sigma的，一般用0.8ml就够了； 3.融合时间的控制，一般为90s，不能太长，否则细胞因毒性大，而出现死亡，融合完，立即用1640培养基（不加FBS）终止融合，5min，前2min同融合时速度，后3min逐渐加快； 4.SP2/0的状态也一定要好，不然效率也不高； 5.本人只是有限，其它请其它大虾补充； |
4楼2011-06-18 08:49:13