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lxh311

木虫 (正式写手)

BioEPI: 1
应助: 3 (幼儿园)
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帖子: 663
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虫号: 423797
注册: 2007-07-21
性别: GG
专业: 肿瘤预防

【答案】应助回帖

★ ★ ★
adslye(金币+3): 感谢应助~祝顺利！ 2011-08-12 10:26:25
silicare(BioEPI+1): 2011-08-12 16:00:26

引用回帖:

Originally posted by sisifly at 2011-05-16 14:14:16:
我上周五做了次细胞融合。。今天看了融合率好低不到10%。。我用的是自己配的PEG4000，50%。。。我融合时候作用时间有点长，，用了两分钟。。。我同学上次用了一分钟她融合率差不多60%。。。可是也不高啊。。各位大 ...

看了你的描述，我大概知道原因了，以下几点：
1.PEG最好是购买Sigma的，这是很关键的融合剂，特别是生手，我实在不敢恭维你配置的效果，做到熟练了再考虑自己配PEG；
2.PEG2000,4000,6000，分子量越大，越稠，毒性也越强，你要选择合适分子量的PEG，买sigma的，一般用0.8ml就够了；
3.融合时间的控制，一般为90s，不能太长，否则细胞因毒性大，而出现死亡，融合完，立即用1640培养基（不加FBS）终止融合，5min，前2min同融合时速度，后3min逐渐加快；
4.SP2/0的状态也一定要好，不然效率也不高；
5.本人只是有限，其它请其它大虾补充；