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简单HE认真

木虫 (小有名气)

[求助] 细胞融合问题请教?

各位虫友,你们好!我最近做细胞融合总是遇到污染,请教了一些有经验的人,说是支原体或是黑胶虫,而且一般都是sp 20出现污染,很困惑不知该如何解决,请各位赐教。
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简单做人,认真做事。
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yxx107

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-18 08:45:39
出现这种情况很不好解决,一方面对细胞室进行全面清洁,查看通风净化系统是不是该换了?另一方面购买治疗支原体的药物,需要治疗几个星期看细胞形态有没有恢复。祝好运!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-11-10 21:15:15
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简单HE认真

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yxx107 at 2013-11-10 21:15:15
出现这种情况很不好解决,一方面对细胞室进行全面清洁,查看通风净化系统是不是该换了?另一方面购买治疗支原体的药物,需要治疗几个星期看细胞形态有没有恢复。祝好运!
...

谢谢,再请问一下这种情况,有一些比较重要的细胞,将就冻存,3个月有复苏的希望吗;还有我们的sp2/0用了很久了,有必要再买进新的吗?
简单做人,认真做事。
3楼2013-11-13 12:07:00
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yxx107

木虫 (小有名气)

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-18 08:45:48
引用回帖:
3楼: Originally posted by 简单HE认真 at 2013-11-13 12:07:00
谢谢,再请问一下这种情况,有一些比较重要的细胞,将就冻存,3个月有复苏的希望吗;还有我们的sp2/0用了很久了,有必要再买进新的吗?...

如果细胞状态已经不好,再进行冻存的话,后面复苏时细胞状态也不会好,还有可能复苏不起来。
细胞室清洁必须打扫好,要不然即使买进新的细胞后面还是很容易就被污染的。因为支原体如果出现的话很难被清除干净的。
4楼2013-11-13 14:13:44
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jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-18 08:45:57
引用回帖:
3楼: Originally posted by 简单HE认真 at 2013-11-13 12:07:00
谢谢,再请问一下这种情况,有一些比较重要的细胞,将就冻存,3个月有复苏的希望吗;还有我们的sp2/0用了很久了,有必要再买进新的吗?...

sp2/0如果你觉得很久了,你可以用8-AG筛选一下,使你的sp2/0细胞对HAT更加敏感,完成后再进行亚克隆一下,冻存好几批备用就OK了,我之前有短时间也是融合的很不好,也遇到污染,首先将细胞房进行了彻底的清洁消毒,感觉有污染的细胞,果断点丢掉,然后再重新养细胞,SP2/0如上处理后,这样再融合就很好了,基本维持到现在没出过问题。希望对你有用。
Orbetterit,orenjoyit!
5楼2013-11-18 05:40:48
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owl365

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

支原体可以检测,大家说的黑胶虫我个人觉得是细胞状态较差,一些碎片之类的东西,优化培养条件会变没有的

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2013-11-18 08:30:34
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