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caaslc

金虫 (小有名气)

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[求助] 跪求，，单链退火形成双链的步骤

我有两条长度为106bp的互补单链DNA序列，请教各位大虾，怎样将其退火形成双链DNA呀，求具体步骤。
Tm=78.08 78.47
%GC=50 50.94
需要把这两条链配制成多大浓度呀？越详细越好啊！拜谢了！

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对科研的评价，我用两个字概括：呵呵

1楼2013-11-06 11:37:41

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caaslc

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-06 13:01:59
以下两种都是成功的做法
第一种做法：取两单链互补DNA各1ul(100uM),加入48ddH2O，于EP管中，然后于沸水中煮5min，然后EP管连同沸水一起慢慢冷却至室温

第二种做法：溶于任一种buffer中，变性冷却，buffer可以为 ...

你好，请问第一种方法不需要buffer吗，直接加入48ul 水，最后浓度会不会太低呀