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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 考马斯亮蓝染色后的图片 不知如何解释
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cr203

新虫 (初入文坛)

[交流] 考马斯亮蓝染色后的图片 不知如何解释 已有3人参与

植物蛋白粗提液 非变性凝胶电泳 考马斯亮蓝染色师这样的 是不是没提出酶？植物蛋白粗提液 非变性凝胶电泳 考马斯亮蓝染色师这样的 是不是没提出酶？植物蛋白粗提液 非变性凝胶电泳 考马斯亮蓝染色师这样的 是不是没提出酶？植物蛋白粗提液 非变性凝胶电泳 考马斯亮蓝染色师这样的 是不是没提出酶？
考马斯亮蓝染色后的图片 不知如何解释
考马斯2.jpg
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1楼 2013-11-02 21:09:52
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ynkuaile

木虫 (小有名气)
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-06 01:47:23
有蛋白，只是胶没跑好。生物科学版有个版主，他非变性胶跑的非常好，你去请教请教。
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2楼2013-11-02 21:56:19
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cr203

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-11-02 21:56:19
有蛋白，只是胶没跑好。生物科学版有个版主，他非变性胶跑的非常好，你去请教请教。

是不是表示提取出来的酶种类很少？谢谢哈
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3楼2013-11-02 22:09:38
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:56:23
不知道你是用什么方法提的粗酶液，用的什么组织。是叶片吗？如果是，最明显的带可能是Rubisco。如果怀疑样品是否没有提好，应该检查提取方法问题。组织破碎情况如何。你的上样量是多少μg蛋白？
一般跑非变性胶的目的是in-gel检测酶的活性或者看目标蛋白是否形成多亚基复合体。你跑活性胶的目的是什么？
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4楼2013-11-04 01:05:14
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luyongchao

新虫 (小有名气)
★
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样品含酸？那黄色的带好像我以前做的时候也出现过
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5楼2013-11-04 11:18:01
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cr203

新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-04 01:05:14
不知道你是用什么方法提的粗酶液，用的什么组织。是叶片吗？如果是，最明显的带可能是Rubisco。如果怀疑样品是否没有提好，应该检查提取方法问题。组织破碎情况如何。你的上样量是多少μg蛋白？
一般跑非变性胶的目 ...

用的是 1/15M pH7.8磷酸缓冲液 穿心莲叶片 液氮研磨 电泳是点样15ul
我们跑胶是为了进行遗传分析吧 看它的酶带
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6楼2013-11-04 20:01:28
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cr203

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by luyongchao at 2013-11-04 11:18:01
样品含酸？那黄色的带好像我以前做的时候也出现过

用的磷酸缓冲液
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7楼2013-11-04 20:03:00
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
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引用回帖:
6楼: Originally posted by cr203 at 2013-11-04 20:01:28
用的是 1/15M pH7.8磷酸缓冲液 穿心莲叶片 液氮研磨 电泳是点样15ul
我们跑胶是为了进行遗传分析吧 看它的酶带...

跑胶前最好对样品做蛋白浓度定量。如果你有方法检测你的目标酶是活性的话最好也测一下酶活。
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cr203
8楼2013-11-05 08:59:50
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cr203

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
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8楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-05 08:59:50
跑胶前最好对样品做蛋白浓度定量。如果你有方法检测你的目标酶是活性的话最好也测一下酶活。...

非常感谢 昨天用叶片（不是很嫩）再提了一次 考染还是不明显 用另外植株幼嫩叶片考染明显 所以准备组培用一下嫩叶 酶活也准备一下 再次感谢指教……
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9楼2013-11-05 18:13:52
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