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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 半胱氨酸上的巯基氧化
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老李笑笑

新虫 (小有名气)

[求助] 半胱氨酸上的巯基氧化 已有2人参与

半胱氨酸与含有羧基的化合物在EDC NHS 存在条件下反应后，测得红外2500左右没有巯基的峰 怎么知道巯基有没有被氧化啊 氧化后可能生成什么呢？求指点啊

[ Last edited by 费姚永芬 on 2013-11-1 at 17:14 ]
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1楼 2013-11-01 17:01:21
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perennials

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+1, 周末愉快，谢谢应助，欢迎常来分析版交流 2013-11-03 11:36:14
老李笑笑: 金币+1 2013-11-04 18:17:23
老李笑笑: 金币+2, ★有帮助 2013-11-18 15:48:08
巯基氧化后两个巯基生成二硫键，不知道二硫键在IR上还有没有吸收峰。好像看文献，用NaBH4还原后可以用DTNB测巯基含量。还原前和DTNB不反应，还原后反应，那就是你的已经被氧化了，或者直接测还原后的IR。
有个问题请教，cys反应时需要避光吗？不避光会如何呢？也会氧化吗？
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2楼2013-11-03 11:30:23
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老李笑笑

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by perennials at 2013-11-03 11:30:23
巯基氧化后两个巯基生成二硫键，不知道二硫键在IR上还有没有吸收峰。好像看文献，用NaBH4还原后可以用DTNB测巯基含量。还原前和DTNB不反应，还原后反应，那就是你的已经被氧化了，或者直接测还原后的IR。
有个问题 ...

我没有避光 现在也不确定有没有氧化
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3楼2013-11-04 18:17:47
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老李笑笑

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by perennials at 2013-11-03 11:30:23
巯基氧化后两个巯基生成二硫键，不知道二硫键在IR上还有没有吸收峰。好像看文献，用NaBH4还原后可以用DTNB测巯基含量。还原前和DTNB不反应，还原后反应，那就是你的已经被氧化了，或者直接测还原后的IR。
有个问题 ...

文献上有的说需要避光 我的反应也是在避光下进行的。
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4楼2013-11-18 15:48:50
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tjbbtjbbtjbb

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 老李笑笑 at 2013-11-18 15:48:50
文献上有的说需要避光 我的反应也是在避光下进行的。...

你好，我也在做相关的工作，想知道你在避光条件下做出来的效果如何；还有，这个和DTNB反应需要有温度要求么，我有看到文献说是将DTNB搁25℃水浴中；还有，反应使用0.5M pH8.0的PBS缓冲液为溶剂的么？
谢谢
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5楼2013-12-04 19:06:51
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老李笑笑

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by tjbbtjbbtjbb at 2013-12-04 19:06:51
你好，我也在做相关的工作，想知道你在避光条件下做出来的效果如何；还有，这个和DTNB反应需要有温度要求么，我有看到文献说是将DTNB搁25℃水浴中；还有，反应使用0.5M pH8.0的PBS缓冲液为溶剂的么？
谢谢...

其实我也不是很明白 用缓冲溶液是因为EDC NHS 活化反应的酸度有一定的要求  至于DTNB我也不是很明白 因为我没有做过 避光反应影响不大
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6楼2013-12-07 18:04:36
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tjbbtjbbtjbb

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 老李笑笑 at 2013-12-07 18:04:36
其实我也不是很明白 用缓冲溶液是因为EDC NHS 活化反应的酸度有一定的要求  至于DTNB我也不是很明白 因为我没有做过 避光反应影响不大...

谢谢您  我还有不太清楚的是：巯基对光和空气的敏感程度，在空气中反应时会不会很快发生生成二硫键的副反应呀？ 希望您能帮我解答一下疑惑！
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7楼2013-12-16 15:37:01
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swallow13

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2013-12-16 17:01:16
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大眼睛木蜻蜓

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也在做这个，我的半胱氨酸放在冰箱冷藏很久都没事，能与DTNB显色，但32度水浴过夜就检测不出来了是为什么啊，是不是加热加速氧化啊，我现在在通氮气做一个水浴对照的，看看什么情况
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9楼2016-01-27 22:11:11
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拔刀斋

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 大眼睛木蜻蜓 at 2016-01-27 22:11:11
我也在做这个，我的半胱氨酸放在冰箱冷藏很久都没事，能与DTNB显色，但32度水浴过夜就检测不出来了是为什么啊，是不是加热加速氧化啊，我现在在通氮气做一个水浴对照的，看看什么情况

后来什么情况？
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10楼2016-05-13 15:58:30
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