应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助如何去除脂蛋白中的triton-X114
51/1返回列表
查看: 2792  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小虫友

金虫 (小有名气)

[求助] 求助如何去除脂蛋白中的triton-X114

最近在用triton-X114提取分离膜蛋白：结果做western蛋白变性时, detergent 层的蛋白煮完后很粘稠，上样感觉有油块状，跑出来的条带也拖尾严重。后面想先用丙酮变性 detergent 层蛋白，将triton114去掉，再用蛋白溶解液复溶蛋白，但老是溶解不完全，蛋白损失严重。请问哪位高手能指导下：如何 去掉detergent 层蛋白中的tritonX114和氯化钠，又能减少蛋白的损失和不可逆变性?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-31 20:22:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwl9426

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-31 23:32:28
triton x-114层主要是膜蛋白，变性时不宜煮，否则会变粘稠。你可以用丙酮沉淀除去detergent，不过，triton x-114层的样品沉淀后不好溶解，因为脂类被抽走，膜蛋白的溶解性变差。一般直接溶解在上样buffer里跑电泳。

楼主您好  我是东南大学的一名研究生  你知道如何溶解PMP22（peripheral myelinprotein 22）膜蛋白吗？
我自己加入了DPC和KPI，最后还是不溶解！真的弄得头大啊！
谢谢了！
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-19 12:14:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-01 01:59:14
小虫友: 金币+20, ★有帮助 2013-12-03 14:39:34
triton x-114层主要是膜蛋白，变性时不宜煮，否则会变粘稠。你可以用丙酮沉淀除去detergent，不过，triton x-114层的样品沉淀后不好溶解，因为脂类被抽走，膜蛋白的溶解性变差。一般直接溶解在上样buffer里跑电泳。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-10-31 23:32:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫友

金虫 (小有名气)
您的意思是说，用丙酮去除detergent后，不加热变性，直接用上样5xbuffer溶剂沉淀，然后跑电泳？我曾经有试过用丙酮沉淀后用含SDS和triton100的buffer 溶解，但效果还是不好。
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-01 08:27:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小虫友 at 2013-11-01 08:27:46
您的意思是说，用丙酮去除detergent后，不加热变性，直接用上样5xbuffer溶剂沉淀，然后跑电泳？我曾经有试过用丙酮沉淀后用含SDS和triton100的buffer 溶解，但效果还是不好。

是的。Triton层里都是疏水性强的跨膜蛋白，即使有SDS增溶，溶解性还是比较差的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-12-03 15:47:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 07:01 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 07:01 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 06:53 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:48 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:48 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 05:41 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 05:22 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 3/150 2026-11-01 04:04 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 03:59 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 25/1250 2026-11-01 03:30 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 12/600 2026-11-01 02:19 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-11-01 00:41 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 12/600 2026-11-01 00:15 by YXM1FDCSE8Bn
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 13/650 2026-10-31 17:12 by hKe7U1kad5Sg
[硕博家园] 越来越担心硕士毕业后没有竞争力了 +8 zuesli 2026-10-27 14/700 2026-10-30 22:44 by 好运连连公主
[文学芳草园] 闲聊 +3 myrtle 2026-10-25 6/300 2026-10-29 15:28 by myrtle
[考博] 申博求助 20+3 Katrinae 2026-10-26 4/200 2026-10-27 09:56 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭