应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教去除乳腺组织中的脂肪，浓缩蛋白的方法
61/1返回列表
查看: 671  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tttanghao

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教去除乳腺组织中的脂肪，浓缩蛋白的方法

目前在做乳腺癌相关的一个western blot
遇到一些情况：1，条带有拖尾现象，不知是否与医生取的样品组织中含有大量的脂肪有关；2，测bradford测的总蛋白，每孔上样量一致，但个别条带跑出来的actin还是比其他 的浅；3，目的条带特别浅

因为样品已经加了loding buffer煮过了，而且特别少，现在也不好再向医生要样品了
所以想提出两个问题，以期解决上述：
1，如何去除像这样的少量的样品中的脂肪；
2，如何浓缩像这样的少量样品的蛋白？

希望能得到大家的解答
并讨论下上述几个情况为何会出现。。。。

[ Last edited by tttanghao on 2010-12-16 at 11:07 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-16 10:22:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tttanghao

新虫 (小有名气)
沉了
自己顶起一下。。。
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-16 10:48:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tttanghao

新虫 (小有名气)
没人讨论吗？
是我说的不清楚？还是没有好的解决方法呢？
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-17 08:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-12-17 11:16:00
tttanghao(金币+1):感谢回复 2010-12-17 17:58:35
最好是脱脂肪后在定量和western blot，用1：1的乙醇与乙醚的混合液沉淀蛋白和祛除脂肪。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-12-17 11:11:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tttanghao

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xhjggl at 2010-12-17 11:11:46:
最好是脱脂肪后在定量和western blot，用1：1的乙醇与乙醚的混合液沉淀蛋白和祛除脂肪。

乙醇和乙醚的混合物如何去除呢？
请问具体的操作方法是？已经加了loding buffer的蛋白还能这么操作吗？
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-17 18:00:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)
tttanghao(金币+1): 2010-12-22 11:07:19
沉淀祛除悬浮的脂肪和乙醇与乙醚的混合液，待乙醇与乙醚的混合液残留液挥发后，用一倍的loading buffer溶解。
赞一下 回复此楼
6楼2010-12-18 15:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tttanghao 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭