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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因表达量低
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xiaohanyudxl

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因表达量低

基因表达量很低，定量时CT值在35左右，可不可以通过重新设计引物将其扩增产物增长来降低CT值呢？请各位大侠帮忙，不胜感激！
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1楼 2013-10-30 18:26:01
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hjyxm

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaohanyudxl at 2013-10-31 21:46:17
我想的话，要是基因表达量低，是不是可以设置一对长扩增产物的引物，这样的话即使产量低，但是长链产物可以结合更多的荧光基团，可提前检测到荧光信号值，CT值也相应减小了？...

CT值的大小跟模板的量有关，与扩增长度无关吧！而且荧光定量PCR产物长度最好在90-250之间吧！仅供参考！
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xiaohanyudxl
好好工作！
4楼2013-11-01 08:34:36
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hjyxm

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-31 13:10:14
重新设计引物不会降低CT值的。怎样提高基因的表达量，要看你的基因在什么载体上表达了！你的描述的信息量太少，不好提供参考意见！
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好好工作！
2楼2013-10-31 09:38:55
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xiaohanyudxl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hjyxm at 2013-10-31 09:38:55
重新设计引物不会降低CT值的。怎样提高基因的表达量，要看你的基因在什么载体上表达了！你的描述的信息量太少，不好提供参考意见！

我想的话，要是基因表达量低，是不是可以设置一对长扩增产物的引物，这样的话即使产量低，但是长链产物可以结合更多的荧光基团，可提前检测到荧光信号值，CT值也相应减小了？
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3楼2013-10-31 21:46:17
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xiaohanyudxl

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by hjyxm at 2013-11-01 08:34:36
CT值的大小跟模板的量有关，与扩增长度无关吧！而且荧光定量PCR产物长度最好在90-250之间吧！仅供参考！...

谢谢您！
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5楼2013-11-05 10:52:45
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