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xiaohanyudxl

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因表达量低

基因表达量很低,定量时CT值在35左右,可不可以通过重新设计引物将其扩增产物增长来降低CT值呢?请各位大侠帮忙,不胜感激!
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hjyxm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-31 13:10:14
重新设计引物不会降低CT值的。怎样提高基因的表达量,要看你的基因在什么载体上表达了!你的描述的信息量太少,不好提供参考意见!
好好工作!
2楼2013-10-31 09:38:55
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xiaohanyudxl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hjyxm at 2013-10-31 09:38:55
重新设计引物不会降低CT值的。怎样提高基因的表达量,要看你的基因在什么载体上表达了!你的描述的信息量太少,不好提供参考意见!

我想的话,要是基因表达量低,是不是可以设置一对长扩增产物的引物,这样的话即使产量低,但是长链产物可以结合更多的荧光基团,可提前检测到荧光信号值,CT值也相应减小了?
3楼2013-10-31 21:46:17
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hjyxm

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaohanyudxl at 2013-10-31 21:46:17
我想的话,要是基因表达量低,是不是可以设置一对长扩增产物的引物,这样的话即使产量低,但是长链产物可以结合更多的荧光基团,可提前检测到荧光信号值,CT值也相应减小了?...

CT值的大小跟模板的量有关,与扩增长度无关吧!而且荧光定量PCR产物长度最好在90-250之间吧!仅供参考!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

好好工作!
4楼2013-11-01 08:34:36
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xiaohanyudxl

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by hjyxm at 2013-11-01 08:34:36
CT值的大小跟模板的量有关,与扩增长度无关吧!而且荧光定量PCR产物长度最好在90-250之间吧!仅供参考!...

谢谢您!
5楼2013-11-05 10:52:45
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