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lipanxy2

新虫 (初入文坛)

[求助] 293细胞真核表达,最终表达在什么地方

细菌粘附素重组质粒在293细胞中表达,载体为pcDNA3。最终蛋白会表达在哪里?
我用的是cell lysis buffer裂解细胞,离心取上清。然后western blot检测,但是始终检测不到特异表达。
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lipanxy2

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-10-30 22:42:09
这个蛋白表达出来很有可能在细胞的胞浆里面,你用WB检测不到特异表达,有几种情况:
1. 你的抗体不灵,压不出来条带,是否有阳性对照?可以克隆一个带tag的表达载体,比如在蛋白N或者C端fusion一个flag, HA 或者my ...

你好,我已经通过RT-PCR检测到有表达,有阳性对照,可以压出条带的。只是这个转染的没有特异性的条带。
4楼2013-10-31 15:16:17
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lipanxy2

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by huoyongting at 2013-10-31 11:04:54
楼主用的是239的哪种细胞呀

就是293细胞
5楼2013-10-31 15:29:23
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