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匿名

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niuguanghui(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2013-10-29 10:46:19
1.没看懂LZ的实验。因为检测同种抗原不同浓度,可以在不同的孔中平行进行,为啥要洗去前一个抗原然后再上后一个?
2.洗脱抗原一般非特异洗脱用酸洗脱或改变表面活性剂,特异性洗脱用竞争性抗体或配体。
3.从原理上要求将前一浓度的抗原完全洗脱,而不影响后一步的抗原测定是很难实现的,将抗原抗体复合物拆开而不使抗体变性很难,或多或少都会变性,变性程度还不可控。而用抗体多铺几个孔,做平行实验可以进行准确测定。
2楼2013-10-29 10:17:02
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3楼2013-11-01 18:06:42
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4楼2013-11-01 18:10:31
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【答案】应助回帖

★ ★ ★
niuguanghui: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-12-06 14:07:25
1.抗体的效价在反复洗脱后能否保持说不准,·得实验检测。LZ可以试一下改变离子强度和表面活性剂,但光纤的清洗和抗体的复性也是个问题
2.LZ是否可以试试DNA适配子和亲和肽,甚至有机小分子配体库,这些对条件的改变抵抗能力强些,稳定性好一些,前期工作量大,亲和力偏低。
3.LZ可以试试已发表文献的适配子或亲和肽,但如果已经确立抗原靶标了,最好摸抗体条件吧。一般蛋白对温和的表面活性剂稳定性还可以。
希望能看到新型的抗原检测设备
没能帮上啥忙就别给金币了。看看其他人有没有啥更好的办法
5楼2013-11-01 19:21:20
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loreleid

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【答案】应助回帖

参照常规的SPR所用的芯片,可以将抗体都洗脱了再吸附在光纤上做吧,抗体在光纤上的孵育应该是可以重现的。
6楼2014-01-05 19:03:22
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