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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)

[求助] 组培污染严重,求大神指导

本人是做植物组培的,可是很长时间了,植物材料的初代灭菌这步都没做好,

我用的植物材料是芽,不知是否因为接触土壤,灭菌效果总是很不理想,不仅有真菌污染,即使没有真菌也有细菌,实验室采用0.1%升汞灭菌,灭菌时间有10-30min,30min材料有所损伤,而未污染率还是只有30%左右,也用过酒精15S,尝试过超声波清洗,也用过0.2%升汞,可是都很不理想,我用叶片等组织是没有问题的。

请教各位大神啦。。有什么宝贵方法以及意见呢。
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王苏洋

铜虫 (初入文坛)

30%不污染率应该还可以了,
污染率不仅跟消毒浓度时间有关系,
取材时机,季节都会影响,4-6月份和9月份好点
2楼2013-10-28 09:32:20
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 王苏洋 at 2013-10-28 09:32:20
30%不污染率应该还可以了,
污染率不仅跟消毒浓度时间有关系,
取材时机,季节都会影响,4-6月份和9月份好点

我们导师说不到60%以上,论文就没有亮点呀,我们的材料是盆栽在实验室的,不在田间。不过实话说,只是10天左右是这个数据,污染还是会陆续增加的。每次试验做了一批,总是污染一大堆,心里很受伤
3楼2013-10-28 10:28:26
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din9

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
叶子可以,而芽不可以,可能是灭菌不完全,升汞没能全部覆盖上去,试着加几滴吐温20在升汞里面吧

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2013-10-28 16:03:15
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lera

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
升汞消毒7分钟,倒掉,再升汞消毒7分钟,清洗~
5楼2013-10-28 16:40:35
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taykun

铁虫 (初入文坛)

清洗的水用组培瓶单独装来灭菌,洗一次用一瓶别反复用试试?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2013-10-28 18:32:11
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by din9 at 2013-10-28 16:03:15
叶子可以,而芽不可以,可能是灭菌不完全,升汞没能全部覆盖上去,试着加几滴吐温20在升汞里面吧

我加过吐温-80,稍微好一些,可是效果不是很明显呢,我也知道是灭菌不好
7楼2013-10-29 08:11:26
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by taykun at 2013-10-28 18:32:11
清洗的水用组培瓶单独装来灭菌,洗一次用一瓶别反复用试试?

洗就是这么洗的哦
8楼2013-10-29 08:14:07
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lera at 2013-10-28 16:40:35
升汞消毒7分钟,倒掉,再升汞消毒7分钟,清洗~

是7min之后,在用新的升汞灭菌吗?我可以试试,谢谢
9楼2013-10-29 08:15:30
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robocop

木虫 (著名写手)

初代培养30%的成活率 我觉得不错了。。而且是芽
纵然我扑倒在地,一颗心依然举着你.晨曦中你拔地而起,我就在你的形象里。
10楼2013-10-29 14:04:15
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