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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 组培污染严重，求大神指导
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)

[求助] 组培污染严重，求大神指导

本人是做植物组培的，可是很长时间了，植物材料的初代灭菌这步都没做好，

我用的植物材料是芽，不知是否因为接触土壤，灭菌效果总是很不理想，不仅有真菌污染，即使没有真菌也有细菌，实验室采用0.1%升汞灭菌，灭菌时间有10-30min，30min材料有所损伤，而未污染率还是只有30%左右，也用过酒精15S，尝试过超声波清洗，也用过0.2%升汞，可是都很不理想，我用叶片等组织是没有问题的。

请教各位大神啦。。有什么宝贵方法以及意见呢。
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1楼 2013-10-28 08:50:58
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王苏洋

铜虫 (初入文坛)
30%不污染率应该还可以了，
污染率不仅跟消毒浓度时间有关系，
取材时机，季节都会影响，4-6月份和9月份好点
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2楼2013-10-28 09:32:20
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王苏洋 at 2013-10-28 09:32:20
30%不污染率应该还可以了，
污染率不仅跟消毒浓度时间有关系，
取材时机，季节都会影响，4-6月份和9月份好点

我们导师说不到60%以上，论文就没有亮点呀，我们的材料是盆栽在实验室的，不在田间。不过实话说，只是10天左右是这个数据，污染还是会陆续增加的。每次试验做了一批，总是污染一大堆，心里很受伤
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3楼2013-10-28 10:28:26
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din9

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
叶子可以，而芽不可以，可能是灭菌不完全，升汞没能全部覆盖上去，试着加几滴吐温20在升汞里面吧
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天天の太阳
4楼2013-10-28 16:03:15
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lera

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
升汞消毒7分钟，倒掉，再升汞消毒7分钟，清洗~
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5楼2013-10-28 16:40:35
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taykun

铁虫 (初入文坛)
清洗的水用组培瓶单独装来灭菌，洗一次用一瓶别反复用试试？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2013-10-28 18:32:11
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by din9 at 2013-10-28 16:03:15
叶子可以，而芽不可以，可能是灭菌不完全，升汞没能全部覆盖上去，试着加几滴吐温20在升汞里面吧

我加过吐温-80，稍微好一些，可是效果不是很明显呢，我也知道是灭菌不好
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7楼2013-10-29 08:11:26
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by taykun at 2013-10-28 18:32:11
清洗的水用组培瓶单独装来灭菌，洗一次用一瓶别反复用试试？

洗就是这么洗的哦
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8楼2013-10-29 08:14:07
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天天の太阳

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lera at 2013-10-28 16:40:35
升汞消毒7分钟，倒掉，再升汞消毒7分钟，清洗~

是7min之后，在用新的升汞灭菌吗？我可以试试，谢谢
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9楼2013-10-29 08:15:30
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robocop

木虫 (著名写手)
初代培养30%的成活率 我觉得不错了。。而且是芽
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纵然我扑倒在地，一颗心依然举着你.晨曦中你拔地而起，我就在你的形象里。
10楼2013-10-29 14:04:15
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