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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱法测定极性较大的化合物时 如何摸索色谱条件
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zhangfengmei

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱法测定极性较大的化合物时 如何摸索色谱条件

我现在检测的是头孢类药物中的一个中间体   极性很大   类似盐   想用反相液相色谱法检测纯度   没有太多经验  找不到好的液相条件    还请老师们告诉我这类化合物怎么摸索条件      万分感谢  ！！！
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低调做人
1楼 2013-10-21 21:26:39
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mayanshun

金虫 (小有名气)
★
suruiqin: 金币+1, 鼓励交流，感谢您的参与，欢迎常来分析版~ 2013-10-23 14:46:27
要根据化合物的结构来确定液相分离模式，不是说反相液相对所有的都能进行分析。要用反相的话，在色谱柱能承受的PH范围内，可考虑调整流动相的pH来抑制化合物的离子化，增大疏水作用。
极性大的，比较好的方法是采用亲水色谱作用模式。
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8楼2013-10-23 13:53:52
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ajshen

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangfengmei: 金币+5, ★有帮助, 谢谢 虫友 请问下 一般的C8 C18 的柱子 是不是 不能走纯水啊 谢谢 2013-10-22 13:21:09
首先，药物中间体的结构或者酸碱性是什么？
其次，如果这个中间体极性很大的话用反相色谱可能不太好做，除非用特殊的反相柱，能100%水起步的。
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JESSICA
2楼2013-10-22 08:51:50
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
利用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）分析了儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸等六种酚类物质在鲁加１号和鲁加５号苹果浓缩汁中的的含量。色谱条件：色谱柱为Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ－Ｃ１８色谱柱（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ ｉｄ，５μｍ），以甲醇－１％乙酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱。柱温３０℃，流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长为２８０ｎｍ。在此色谱条件下，各组分均得到很好的分离。经测定鲁加１号苹果浓缩汁中含有儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸等六种酚类物质；鲁加５号苹果浓缩汁中含有较少的绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸等五种酚类物质。流动相由甲醇（Ａ）和１％的乙酸水溶液（Ｖ／Ｖ）（Ｂ）两部分组成，溶剂Ａ在４０ｍｉｎ内由５％上升到３０％，对多酚类物质进行分离，然后变为１００％，并维持５ｍｉｎ。
酚类、羧酸类物质应该算是极性比较大的物质了，希望对你有所帮助。
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浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
3楼2013-10-22 09:14:55
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)
用HILLI柱子试试，可以跑纯水，或者对强极性保留较弱的C18、C8柱子，普通C18，95%的水还是可以的
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4楼2013-10-22 15:16:45
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