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zhangfengmei

新虫 (初入文坛)

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[求助] 高效液相色谱法测定极性较大的化合物时如何摸索色谱条件

我现在检测的是头孢类药物中的一个中间体极性很大类似盐想用反相液相色谱法检测纯度没有太多经验找不到好的液相条件还请老师们告诉我这类化合物怎么摸索条件万分感谢！！！

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低调做人

1楼 2013-10-21 21:26:39

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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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利用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）分析了儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸等六种酚类物质在鲁加１号和鲁加５号苹果浓缩汁中的的含量。色谱条件：色谱柱为Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ－Ｃ１８色谱柱（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ ｉｄ，５μｍ），以甲醇－１％乙酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱。柱温３０℃，流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长为２８０ｎｍ。在此色谱条件下，各组分均得到很好的分离。经测定鲁加１号苹果浓缩汁中含有儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸等六种酚类物质；鲁加５号苹果浓缩汁中含有较少的绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸等五种酚类物质。流动相由甲醇（Ａ）和１％的乙酸水溶液（Ｖ／Ｖ）（Ｂ）两部分组成，溶剂Ａ在４０ｍｉｎ内由５％上升到３０％，对多酚类物质进行分离，然后变为１００％，并维持５ｍｉｎ。
酚类、羧酸类物质应该算是极性比较大的物质了，希望对你有所帮助。