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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于定量PCR的问题
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AP009

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于定量PCR的问题

在做定量PCR的时候，如果要将不同处理下的样品，所提取的mRNA合成c-DNA进行定量PCR时，如果要将c-DNA的浓度调到一样（保证在PCR时所加的模板是一样的），是将mRNA合成为c-DNA后再进行紫外分光光度计的OD值浓度测定，之后根据od值调c-DNA，还是用mRNA进行紫外分光光度计的OD值浓度测定，将mRNA进行浓度的统一，合成c-DNA时加相同浓度的mRNA？？？？
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1楼 2013-10-17 20:14:42
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rainbaiyun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 18:35:53
统一mRNA，这样才能保证反转录效率相当，不然后面cDNA统一也没用的。
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5楼2013-10-22 09:58:37
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taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-19 01:27:20
将mRNA浓度进行统一简单点啊
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用心
2楼2013-10-18 17:03:45
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xv1215

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-19 01:27:26
后者比较简单，先测RNA含量浓度，再根据浓度做rt-PCR,然后统一稀释，做定量pcr

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2013-10-18 18:42:09
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六妖妖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

统一mRNA的浓度就可以了。cDNA不需要调浓度
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4楼2013-10-21 20:44:25
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