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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Trizol提取的RNA有粘稠，跑胶有amear，怎么处理？
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kopbin

铁虫 (小有名气)

[求助] Trizol提取的RNA有粘稠，跑胶有amear，怎么处理？ 已有1人参与

提取的是母猪的绒毛膜组织，取样的时候就有胶冻状的，结果用Trizol提取的总RNA溶液就有粘稠的东西，没法分开，用G25柱子过滤了也不行，自己百度了一下有的说可能是有糖原。。。不知道有没有虫遇到过，解答一下，谢谢！！

顺便说一下三个的A260分别为：0.46、0.28、0.18；  A260：A280分别：1.79、1.97、1.56；  浓度正常。样品会用于建库测序，谢谢各位！！
胶图请看附图。
Trizol提取的RNA有粘稠，跑胶有amear，怎么处理？
RNA条带.png

[ Last edited by kopbin on 2013-10-12 at 20:32 ]
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每天进步一点点
1楼 2013-10-12 20:22:31
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zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-12 22:31:48
这个胶跑的什么都看不到啊，只觉得降解了。动物组织没接触过，不知道怎么处理样品。植物中的多糖据说可以用高盐溶液来分离。
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2楼2013-10-12 21:12:21
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-12 22:32:30
kopbin: 金币+2, ★有帮助 2013-10-13 12:20:01
首先，你的RNA降解很严重
粘稠的东西估计是多糖，你可以试试加一定量的KAc或者无水乙醇
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3楼2013-10-12 21:28:49
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kopbin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Fleaves at 2013-10-12 21:28:49
首先，你的RNA降解很严重
粘稠的东西估计是多糖，你可以试试加一定量的KAc或者无水乙醇

恩，是啊。应该是有降解的，主要还是拖带。网络上也就是说无水乙醇，试试吧，谢谢。
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每天进步一点点
4楼2013-10-13 12:18:43
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wencheng1109

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做的是植物rna多糖的，你用试剂盒试试，有多糖很麻烦

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2013-10-13 12:35:54
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kopbin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wencheng1109 at 2013-10-13 12:35:54
我做的是植物rna多糖的，你用试剂盒试试，有多糖很麻烦

恩，是很麻烦。再请问一下，试剂盒是说用试剂盒提取，还是用试剂盒去杂质？
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每天进步一点点
6楼2013-10-15 09:48:41
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wencheng1109

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kopbin: 金币+2, ★有帮助 2013-10-16 16:03:13
引用回帖:
6楼: Originally posted by kopbin at 2013-10-15 09:48:41
恩，是很麻烦。再请问一下，试剂盒是说用试剂盒提取，还是用试剂盒去杂质？...

因为公司做的试剂盒有他的配方所以一般都是直接提rna的，不过takara公司有rna纯化的试剂，你可以看看。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2013-10-15 12:07:51
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不喝咖啡

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我做植物的，但是现在应该有直接用于多糖类动物RNA提取的试剂盒吧，你可以查一下，或者直接问卖药品的公司，让他们给你查，植物就有用于多糖多酚样品提取RNA的试剂盒，照目前你提取的样品，用于建库不合适，降解太严重
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8楼2013-11-06 16:04:29
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阿尔沃恩

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

植物去除多糖多酚的试剂盒也可以用在动物材料上试试。
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9楼2015-06-01 14:25:31
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