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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 高保真酶的使用情况
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lvsihan

银虫 (正式写手)

[交流] 高保真酶的使用情况

各位做分子生物的应该多多少少都用到过高保真酶吧，有没有突变率低而且好用的高保真酶的推荐啊？种类太多是在不是要怎么挑。而且说明书上说的保真性的比较，但是没有实际使用的经历，我还是希望各位大神经验丰富的能帮帮忙！！！
高保真酶的使用情况
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1楼 2013-10-05 21:37:48
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DAX1

新虫 (小有名气)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-06 00:22:21
Pfu基本不用。推荐kod, pyrobest,phusion.保真度都还不错，而且扩增速度快。
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2楼2013-10-05 21:53:07
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-06 00:22:27
首推KOD，另外也用过Q5，phusion
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3楼2013-10-05 22:37:36
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mandeler

新虫 (初入文坛)
★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-06 18:09:39
pfu酶以前用过，貌似不错的，现在在用phusion，效果感觉差不多

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-10-06 08:14:53
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peakg7

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-06 18:09:48
一直用neb的q5 ，方便好用，感觉比pfu好
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5楼2013-10-06 11:36:52
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ifyousee

新虫 (小有名气)
★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-06 18:09:55
这个，现在这年头，在这里随便说几家公司的名字就会被封号，我好怕怕的说
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7楼2013-10-06 13:45:40
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qiuqu_200212

至尊木虫 (知名作家)
呵呵，扩增效率不太好。
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8楼2013-10-06 13:55:19
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xiaoche

铜虫 (小有名气)
★
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KOD很好用的，高保真，而且扩增效率非常高的。
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9楼2013-10-06 22:59:30
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
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最近一直在用primerSTAR max,采用两步法，扩增速度快，保真性也很不错，最主要不用摸退火温度，方便。但是，感觉扩增GC含量高的片段较实用。
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10楼2013-10-07 08:45:23
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ygdeying_11

铁虫 (小有名气)
★
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neb或thermo的phusion
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11楼2013-10-08 12:07:32
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lvsihan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by joan198108 at 2013-10-07 08:45:23
最近一直在用primerSTAR max,采用两步法，扩增速度快，保真性也很不错，最主要不用摸退火温度，方便。但是，感觉扩增GC含量高的片段较实用。

什么叫不用摸退火温度啊，难道什么温度都扩的出来吗？这个酶是不是太强大了点啊？
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12楼2013-10-09 12:52:09
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lvsihan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ifyousee at 2013-10-06 13:45:40
这个，现在这年头，在这里随便说几家公司的名字就会被封号，我好怕怕的说

你是来赚金币的吧……
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13楼2013-10-09 12:52:52
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
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12楼: Originally posted by lvsihan at 2013-10-09 12:52:09
什么叫不用摸退火温度啊，难道什么温度都扩的出来吗？这个酶是不是太强大了点啊？...

退火跟延伸全部用72℃，一次完成
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14楼2013-10-09 13:20:50
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匿名

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★
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15楼2014-08-27 22:19:29
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匿名

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16楼2014-08-27 22:20:12
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
15楼: Originally posted by pf790352975 at 2014-08-27 22:19:29
扩增6k应该没问题吧？？...

6K好像比较长吧，没试过，一般扩增2K及短于2K的
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17楼2014-08-27 23:15:15
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by pf790352975 at 2014-08-27 22:20:12
这都行》》》？？？好可怕的感觉  72度退火是不是有点高...

我一直用这个条件，实验结果表明确实可行且结果不错
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18楼2014-08-27 23:15:59
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令狐少陈

铜虫 (小有名气)
★
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我就用phusion 很好啊 NEB
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19楼2014-08-27 23:18:31
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
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高保真酶用Pfu，至于PrimeStar系列也可能由Pfu酶衍生而来，还可能是Pfu与Taq的混合溶液。
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20楼2014-08-28 10:35:40
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
★
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一般的话，KOD挺好
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21楼2014-08-28 16:16:02
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Smilelzx6楼
2013-10-06 12:16   回复  
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