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yinyin1988木虫 (小有名气)
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液相色谱 流动相的问题 已有2人参与
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| 查了一下高效液相色谱常用的流动相为甲醇-水和乙腈-水，很多人说样品溶液和标准品溶液最好用流动相来配制，但是很多有机物都不溶于甲醇-水和乙腈-水体系或溶解不完全（不均匀或不成均相吧），是否说明样品溶液可以不用流动相来配制啊，如果是，那是不是用流动相中的有机相（甲醇或乙腈）来配制会比其他溶剂要好些啊 |
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10楼2013-10-02 14:49:50
tianxia119wo
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楼主你好，目前hplc分析多为反相色谱，流动相多为甲醇、乙腈、水，加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。最佳的溶解方法是用流动相溶解，但是很多情况是不一致的。当用溶剂极性强度大的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主，样品进样量大，如定量管为20ul，此条件下完全可以肯定，单一的纯物质出双峰，第二峰比第一峰小（每次都不太一样），且拖尾，保留时间会提前(相对进样量少而言)，将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。上面提到进样量造成双峰的一个原因，另一个原因是，进样量不一定大，但绝对量很大，色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是色谱柱问题）。将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大，色谱柱过载造成的。 稀释剂如果不能跟流动相保持一致，即稀释剂不能完全溶解样品时，我自己通常会加入其中的有机相也就是甲醇或者乙腈来辅助溶解，液相样品超声溶解也是很普遍的。假如样品依旧不溶解，我自己通常选择过滤，然后走样。认为假如调整有机相比例后仍不能溶解，假如加入异丙醇之类溶剂辅助溶解，遇到流动相后有可能析出样品，造成柱子堵塞，得不偿失的。样品过滤后依然较为浑浊，需要再过滤，还不行就只好放弃进样了。 |
2楼2013-10-01 14:46:36
tianxia119wo
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3楼2013-10-01 14:48:12
tianxia119wo
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4楼2013-10-01 14:50:30
