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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱 流动相的问题
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
release53: 金币+5, ACI+1, 感谢您的交流互动，欢迎常来分析版 2013-10-03 20:50:56
楼主你好，目前hplc分析多为反相色谱，流动相多为甲醇、乙腈、水，加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。最佳的溶解方法是用流动相溶解，但是很多情况是不一致的。当用溶剂极性强度大的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主，样品进样量大，如定量管为20ul，此条件下完全可以肯定，单一的纯物质出双峰，第二峰比第一峰小（每次都不太一样），且拖尾，保留时间会提前(相对进样量少而言)，将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。上面提到进样量造成双峰的一个原因，另一个原因是，进样量不一定大，但绝对量很大，色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是色谱柱问题）。将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大，色谱柱过载造成的。


稀释剂如果不能跟流动相保持一致，即稀释剂不能完全溶解样品时，我自己通常会加入其中的有机相也就是甲醇或者乙腈来辅助溶解，液相样品超声溶解也是很普遍的。假如样品依旧不溶解，我自己通常选择过滤，然后走样。认为假如调整有机相比例后仍不能溶解，假如加入异丙醇之类溶剂辅助溶解，遇到流动相后有可能析出样品，造成柱子堵塞，得不偿失的。样品过滤后依然较为浑浊，需要再过滤，还不行就只好放弃进样了。
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浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
2楼2013-10-01 14:46:36
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