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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
release53: 金币+5, ACI+1, 感谢您的交流互动,欢迎常来分析版 2013-10-03 20:50:56
楼主你好,目前hplc分析多为反相色谱,流动相多为甲醇、乙腈、水,加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。最佳的溶解方法是用流动相溶解,但是很多情况是不一致的。当用溶剂极性强度大的试剂,如纯甲醇、纯乙腈,纯乙醇,而分析体系中以水为主,样品进样量大,如定量管为20ul,此条件下完全可以肯定,单一的纯物质出双峰,第二峰比第一峰小(每次都不太一样),且拖尾,保留时间会提前(相对进样量少而言),将进样量减少一半以上,峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大,而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。上面提到进样量造成双峰的一个原因,另一个原因是,进样量不一定大,但绝对量很大,色谱图上的双峰紧靠在一起,基本上齐高,不拖尾(如果出峰很快,也可能是色谱柱问题)。将样品稀释再进样就可以了,这是由于进样量过大,色谱柱过载造成的。


稀释剂如果不能跟流动相保持一致,即稀释剂不能完全溶解样品时,我自己通常会加入其中的有机相也就是甲醇或者乙腈来辅助溶解,液相样品超声溶解也是很普遍的。假如样品依旧不溶解,我自己通常选择过滤,然后走样。认为假如调整有机相比例后仍不能溶解,假如加入异丙醇之类溶剂辅助溶解,遇到流动相后有可能析出样品,造成柱子堵塞,得不偿失的。样品过滤后依然较为浑浊,需要再过滤,还不行就只好放弃进样了。
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
2楼2013-10-01 14:46:36
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